流感病毒H2亚型检测试剂盒荧光PCR法

发布时间:2021-09-01

操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。

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货号

流感病毒H2亚型检测试剂盒、荧光PCR法

50T

详见说明书

BH-P63711


柱式病毒DNA提取试剂盒、柱式病毒DNAout

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。

使用方法:

一、样品DNA的制备

用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。

二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。

1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。

2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。

3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。

4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。

5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。

6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。

7. NC管中不加任何阳性对照。

8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

实验注意事项:

1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;

2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;

3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。

4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。

主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。

主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

山梨脱氢酶检测试剂盒3-丁炔-1- 97%L-半胱氨酸盐酸盐 非动物源,用于培养,EP, USPGDF8/MSTN(growth differntiation factor 8)  生长分化因子8抗原

盐还原酶检测试剂盒1,4-双(三甲基硅烷基)-1,3-丁二炔 98%L-组氨酸盐酸盐,一水 99%GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor)  胶质源性神经营养因子抗原

腺苷酸环化酶1检测试剂盒双(三苯基膦)氯化镍(Ⅱ) 98%L-组氨酸 99%Gelsolin  凝溶胶蛋白抗原

乙酰辅酶A羧化酶1检测试剂盒双(频哪合)二 98%L-组氨酸 EP, USP ,非动物源,用于培养GFP (Green Fluorecent protein)  绿色荧光蛋白多肽抗原

木质素合成酶检测试剂盒叔丁基二甲基硅烷基三氟磺酸酯 98%L-组氨酸 99.5%GFP (Green Fluorecent protein)  绿色荧光蛋白

咖啡酸-O-甲基转移酶检测试剂盒3-溴吡啶 98%L-赖氨酸盐酸盐 99%GITR (glucocorticoidinduced tumor necrosis factor receptor)  糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体抗原

尼克酰检测试剂盒苯并呋喃 99%L-甲硫氨酸 99%GLI1(GLI-Kruppel family member 1)  下游转录因子Gli1蛋白抗原

芳樟合成酶检测试剂盒苄基氯甲基 60%S-甲基-L-半胱氨酸 98%GLP-1/KG-31(Glucagon-like peptide-1) peptide  胰高血糖素样肽-1(多肽)

香叶合成酶检测试剂盒3-溴-5-乙酰基吡啶 97%L-鸟氨酸盐酸盐 98%GLP-1 peptide  胰高血糖素样肽-1(多肽)

氨肽酶检测试剂盒2-溴-5-硝基吡啶 98%L-酪氨酸 99%GLP-1R peptide  胰高血糖素样肽-1受体多肽

25-羟胆钙化检测试剂盒3-溴-5-羟基吡啶 97%6-氨基-1-己  97%GLUT3(Glucose transporter 3)  葡萄糖转运蛋白3抗原

线粒体异柠檬酸脱氢酶检测试剂盒3-溴-5-氯吡啶 97%3,4-二溴噻吩 97%GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors)  粒-巨噬克隆激因子抗原

色氨酸脱羧酶检测试剂盒5-溴-2-基吡啶 97%羟-O-磺酸 97%GPA33(glycoprotein A33 transmembrane)  糖蛋白A33(跨膜)抗原

羟基吲哚-O-甲基转移酶检测试剂盒2-溴-3-吡啶甲 97%6-羟基吲哚 98%glypican 1  磷脂酰基蛋白聚糖-1抗原

5-羟色-N-乙酰转移酶检测试剂盒5-溴-1-戊烯 95%4-羟基吲哚 98%GPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7)  磷脂酰基蛋白聚糖-3(多肽)
流感病毒H2亚型检测试剂盒、荧光PCR法小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PLK1(Serine/threonine-protein kinase PLK1) ELISA KitC型凝集素结构域家族5成员A抗体

小鼠载脂蛋白A2(ApoA2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human NR3C1(Glucocorticoid receptor) ELISA Kit周期素依赖激酶1抗体

小鼠载脂蛋白C3(ApoC3)酶联免疫吸附测定试剂盒Human NDUFS8(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 8, mitochondrial) ELISA Kit衰老抑制基因抗体

小鼠色素P450家族成员2E1(CYP2E1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human NDUFS7(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 7, mitochondrial) ELISA Kit环腺苷酸应答元件结合蛋白抗体

小鼠髓鞘少突胶质糖蛋白(MOG)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PRAP1(Proline-rich acidic protein 1) ELISA Kit酪蛋白激酶1γ1抗体

小鼠锌结合α2-糖蛋白1(AZGP1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CXCL14(C-X-C motif chemokine 14) ELISA Kit21号染色体开放阅读框88抗体

小鼠低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SDCCAG3(Serologically defined colon cancer antigen 3) ELISA Kit21号染色体开放阅读框54抗体

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