本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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货号
禽流感病毒H7亚型检测试剂盒 、荧光PCR法
50T
详见说明书
BH-P63743
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
使用方法:
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
红生成素检测试剂盒甲基烯酸六氟丁酯 96%乙二四乙酸二钠标准溶液 0.05000mol/L (0.05MCD56/NCAM1 (Neural Cell Adhesion Molecule 1) 神经粘附分子1(抗原)
琥珀酸脱氢酶检测试剂盒一正丁 Standard for GC,≥99.7% (GC)乙二四乙酸二钠标准溶液 0.02000mol/L (0.02M)CEAcam8/CD67 (carcinoembryonic Anti-gen-related cell adhesion molecule 8) 癌胚抗原相关粘附分子8(抗原)
花生四烯酸检测试剂盒一正丁 ≥99.5% (GC)乙二四乙酸二钠标准溶液 0.01000mol/L (0.01M)CD68 CD68抗原
环孢素A检测试剂盒一正丁 CP,98%金标准溶液 1000μg/mlCD68 CD68(多肽抗原)
环磷酸鸟苷检测试剂盒 一正丁 ≥99%(GC)金标准溶液 100μg/mlCD117/c-kit/SCFR 干生长因子受体/表面分化抗原(抗原)
环磷酰检测试剂盒二正 CP盐酸标准溶液 1.000mol/L(1N)CD133 Anti-gen 造血干抗原(多肽抗原)
环氧合酶1检测试剂盒二正 99%盐酸标准溶液 0.5000mol/L(0.5N)CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix
环氧合酶2检测试剂盒二戊 99%盐酸标准溶液 0.2000mol/L(0.2N)CD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原
缓激肽检测试剂盒N,N-二甲基乙 99%盐酸标准溶液 0.1000mol/L(0.1N)CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B 和 T 淋巴衰减蛋白(抗原)
脱氢酶检测试剂盒二异丁 99%盐酸溶液 6mol/L(6N)CDK2 (Cyclin-Dependent Kinase 2) 周期素依赖激酶2(抗原)
氧化酶检测试剂盒二异丁 99.5%铁标准溶液 1000μ/mlCDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依赖性激酶4(抗原)
黄体生成素检测试剂盒二异 Standard for GC ≥99.5% (GC)铁标准溶液 100μ/mlCEA (Carcinoembryonic Anti-gen ) 人癌胚抗原(抗原)
活化蛋白C检测试剂盒二异 >99.5%(GC)标准溶液 0.05000mol/L (0.1N)ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 蕈碱型乙酰胆碱受体M2(抗原)
活化凝血因子X检测试剂盒二异 CP,98%铅标准溶液 1000mg/L,溶剂:1%硝酸Connexin-43(Cx43) 间隙连接蛋白43(多肽片断抗原)
活性氮簇检测试剂盒二异 分析标准品,>99.5% (GC)铅标准溶液 100μg/mlConnexin-45(CX45) 间隙连接蛋白45(抗原)
大鼠胶原酶II(Collagenase II)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PIK3CA(Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha isoform) ELISA Kit桥粒芯糖蛋白4抗体
大鼠骨钙素(OC/BGP)酶联免疫吸附测定试剂盒Human S1PR1(Sphingosine 1-phosphate receptor 1) ELISA Kit自然杀伤激活受体相关蛋白DAP12抗体
大鼠骨涎蛋白 (BSP)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PIK3CD(Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit delta isoform) ELISA Kit自然杀伤激活受体相关蛋白DAP12抗体
大鼠粒集落激因子受体(GCSFR)酶联免疫吸附测定试剂盒Human GPX2(Glutathione peroxidase 2) ELISA Kit无精症缺失基因4抗体
大鼠补体1抑制物(C1INH)酶联免疫吸附测定试剂盒Human AMELX(Amelogenin, X isoform) ELISA Kit多能发育相关基因4抗体
大鼠胸腺肽β4(TMSβ4)酶联免疫吸附测定试剂盒Human APEH(Acylamino-acid-releasing enzyme) ELISA Kit锌指蛋白DZIP1抗体
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
禽流感病毒H7亚型检测试剂盒 、荧光PCR法大鼠胶原酶I(Collagenase I)酶联免疫吸附测定试剂盒Human OTX2(Homeobox protein OTX2) ELISA Kit死亡受体5抗体
实验注意事项: