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禽流感病毒H5亚型/H7亚型/H9亚型/甲型检测试剂盒、荧光PCR法
50T
详见说明书
BH-P63751
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
使用方法:
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
酪酪肽检测试剂盒二苯氯 97%氟化铬 AROAT-3(Organic anion transporter 3) 阴离子转运蛋白-3(抗原)
类风湿因子检测试剂盒三氯乙,水合 AR,99.5%氟化镁 AR,97.5% galectin 9 半乳糖凝集素9(抗原)
类胰蛋白酶检测试剂盒苄索氯铵 97%氟酸锌 CPOct-4 胚胎干关键蛋白(多肽)
粒集落激因子检测试剂盒D(-)-对羟基苯甘氨酸 99%氟化锌,无水 AR,99%OPN(osteopontin) 骨桥蛋白(抗原)
粒巨噬集落激因子检测试剂盒亚硝酸异戊酯 95%氟化锌,四水 98%P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A) 抑癌基因p16(抗原)
裂解型糖基化终末产物受体检测试剂盒亚硝酸异戊酯 AR,90%苯并咪唑 AR,98.5%p21/WAF1/CIP1 p21 核分裂抑制因子(抗原)
淋巴素α检测试剂盒乙酸-1-萘酯 CP2-巯基吡啶-1-氧化钠盐 96%p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B) p27(抗原)
淋巴功能相关抗原1检测试剂盒乙酸-1-萘酯 99%2-巯基吡啶-1-氧化钠盐 40%水溶液P63 protein P63 肿瘤抑制基因(抗原)
磷酸二酯酶检测试剂盒草酰二肼 97%角鲨烷 99%OPG(Osteoprotegerin) 护骨素(多肽抗原)
磷酸二酯酶3B检测试剂盒4-磺酸吡啶鎓 98%N-乙基-2-氨甲基吡咯烷 98%OPGL (Osteoprotegerin ligand) 骨保护蛋白配体(抗原)
磷酸甘油酸激酶检测试剂盒1,3-二甲基-2-咪唑啉酮 98%1-(2-二甲基氨基乙基)-1H-5-巯基-四氮唑 98%P311 protein 增生性瘢痕相关蛋白(抗原)
磷酸果糖激酶1检测试剂盒1,3-二甲基-2-咪唑啉酮 用于GC-HS, ≥99.8% (GC)1-乙基-2-吡咯烷酮 99%PARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二磷酸多聚酶抗原
磷酸化AKT蛋白检测试剂盒间甲 98%5-甲基四唑 98%Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human 内脂素/内脏脂肪素(人:N端多肽)、内脏脂肪素、 又称:前B克隆增强因子、内肥素、腹脂素
磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶检测试剂盒扁桃苷 97%2-甲氧基-5-磺酰苯甲酸甲酯 98%Visfatin-1 (PBEF1)(NT) hu、 mo、 rat、MK 内脂素/内脏脂肪素(人、大、小鼠、猴同源:N端多肽)、内脏脂肪素、前B克隆增强因子、内肥素、腹脂素
磷酸化Tau蛋白检测试剂盒氧化苦参碱 98%叠氮钠 AR,99%(剧品)Visfatin-2(CT)hu、mo、rat、MK 内脂素/内脏脂肪素(抗人、大、小鼠、猴:N端多肽)前B克隆增强因子、内肥素、腹脂素
大鼠成纤维生长因子7(FGF7)酶联免疫吸附测定试剂盒Human WDSUB1 (WD repeat, SAM and U-box domain-containing protein 1) ELISA KIT磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白1抗体
大鼠色素P450家族成员2E1(CYP2E1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human HMGA2(High mobility group protein HMGI-C) ELISA Kit磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白抗体
大鼠色素P450(CYP450)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TRIO (Triple functional domain protein) ELISA KIT磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白1抗体
大鼠周期素依赖性激酶抑制因子1A(CDKN1A)酶联免疫吸附测定试剂盒磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白抗体
大鼠附着蛋白1(CYTH1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TCHHL1 (Trichohyalin-like protein 1) ELISA KIT磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白抗体
大鼠附着蛋白相互作用蛋白(CYTIP)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TRMU (Mitochondrial tRNA-specific 2-thiouridylase 1) ELISA KIT磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白抗体
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
禽流感病毒H5亚型/H7亚型/H9亚型/甲型检测试剂盒、荧光PCR法大鼠色素b-561(CYB561)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TAP2 (Antigen peptide transporter 2) ELISA KIT磷酸化形态发生紊乱关联激活因子1抗体