本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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规格
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货号
肺炎支原体和肺炎衣原体检测试剂盒、荧光PCR法
50T
详见说明书
BH-P63783
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
使用方法:
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
乙型肝炎病表面抗体检测试剂盒天麻素 分析标准品,≥98%A甙甜菊糖 97%sIL-2R 大鼠可溶性白介素-2受体
乙型肝炎病表面抗原检测试剂盒橙皮素 97%甜菊苷 80%IL-3 大鼠白介素-3
异常凝血酶原检测试剂盒酚 97%烯酰氯, 96%,含~0.05% 噻吩稳定剂IL-4 大鼠白介素-4
异柠檬酸脱氢酶检测试剂盒厚朴酚 分析标准品,>98%正丁酰氯 98%IL-5 大鼠白介素-5
抑胃肽检测试剂盒冬凌草甲素 分析标准品,≥98%2-氯酰氯 97%IL-6 ELISA KIT 大鼠白介素-6
抑制素A检测试剂盒冬凌草甲素 98%氯乙酰氯 CP,97%sIL-6R 大鼠可溶性白介素-6受体
抑制素B检测试剂盒鬼臼素 98%癸酰氯 98%IL-8 大鼠白介素-8
吲哚2,3-双加氧酶检测试剂盒葛根素 分析标准品,≥98%庚酰氯 99%IL-10 ELISA KIT 大鼠白介素-10
隐热蛋白检测试剂盒青藤碱 分析标准品,≥97%己酰氯 98%IL-11 大鼠白介素-11
优黑素检测试剂盒粉防己碱 分析标准品,≥98%甲基烯酰氯 95%IL-12 大鼠白介素-12
幽门螺旋杆菌IgG抗体检测试剂盒己二酸二酰肼 98%辛酰氯 99%IL-13 大鼠白介素-13
游离睾酮检测试剂盒ε-己内酯 99%三氯乙酰氯 98%IL-15 大鼠白介素-15
游离甲状腺激素检测试剂盒己二酸二甲酯 AR,≥99%特戊酰氯 98%IL-16 大鼠白介素-16
游离前列腺特异性抗原检测试剂盒己二酸二甲酯 CP,98%正戊酰氯 98%IL-17 大鼠白介素-17
游离三甲状腺原氨酸检测试剂盒己二酸二甲酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)2-氨基-5-硝基二苯酮 98%IL-18 大鼠白介素-18
大鼠结合珠蛋白(HP)酶联免疫吸附测定试剂盒Human RCCD1 (RCC1 domain-containing protein 1) ELISA KIT双同源框蛋白4抗体
大鼠70kDa热休克蛋白4(HSPA4)酶联免疫吸附测定试剂盒Human RASAL1 (RasGAP-activating-like protein 1) ELISA KIT无精症缺失基因1抗体
大鼠热休克因子1(HSF1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ANKRD19P (Putative ankyrin repeat domain-containing protein 19) ELISA KIT磷酸化周期检测点激酶2抗体
大鼠热休克蛋白27(HSP-27)酶联免疫吸附测定试剂盒Human RCSD1 (CapZ-interacting protein) ELISA KIT通道蛋白DRK1抗体
大鼠热休克蛋白40(HSP-40)酶联免疫吸附测定试剂盒Human RCE1 (CAAX prenyl protease 2) ELISA KITGTP发育调控结合蛋白1抗体
大鼠热休克蛋白60(Hsp-60)酶联免疫吸附测定试剂盒Human RALGPS1 (Ras-specific guanine nucleotide-releasing factor RalGPS1) ELISA KIT骨架4.1蛋白家族DAL1抗体
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
肺炎支原体和肺炎衣原体检测试剂盒、荧光PCR法大鼠胃泌素(GT)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human RRAD (GTP-binding protein RAD) ELISA KITDNA依赖蛋白激酶催化亚基抗体
实验注意事项: