流感嗜血杆菌检测试剂盒荧光PCR法

发布时间:2021-09-01

操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。

产品名称

规格

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货号

流感嗜血杆菌检测试剂盒、荧光PCR法

50T

详见说明书

BH-P63785


柱式病毒DNA提取试剂盒、柱式病毒DNAout

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。

使用方法:

一、样品DNA的制备

用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。

二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。

1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。

2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。

3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。

4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。

5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。

6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。

7. NC管中不加任何阳性对照。

8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

实验注意事项:

1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;

2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;

3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。

4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。

主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。

主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

整合素αVβ3检测试剂盒4-氯苄基氯 99%四氧化三钴 30nm 球形,99.5%PIIINP  大鼠III型前胶原肽(N端)

整合素β1检测试剂盒邻氯甲苯 standard for GC,≥99.5% (GC)氧化镝 40nm 球形,99.5%Collagen IV  大鼠IV型胶原

正常T表达和分泌因子检测试剂盒邻氯甲苯 AR,98%纳米三氧化二铁(α- Fe2O 30nm 球形,99.5%,α型Collagen VI  大鼠VI型胶原

脂蛋白a检测试剂盒邻氯甲苯 99%纳米三氧化二铁(α- Fe2O 98%,30nm 球形,α型HA  大鼠透明质酸

脂蛋白α检测试剂盒邻氯甲苯 CP纳米磁性氧化铁(γ-Fe2O3 20nm 球形,99.5%,γ型LN  大鼠层粘连蛋白

脂蛋白磷脂酶A2检测试剂盒邻氯甲苯标准溶液1mg/ml,溶剂:甲,用于水质分析四氧化三铁 99%Anti- Alpha-IFN-b (humen)  抗大鼠α干扰素受体

脂蛋白脂酶检测试剂盒邻氯甲苯 分析标准品,≥99.8% (GC)四氧化三铁 97%Activin A  大鼠活化素 A

脂多糖检测试剂盒对氯甲苯 分析标准品,>99.5%(GC)四氧化三铁 99.99% ls basisALCAM  大鼠白活化粘附因子

脂肪酶检测试剂盒对氯甲苯标准溶液 用于水分析,1000ug/ml的甲溶液球型四氧化三铁磁粉 100-300nmcAMP  大鼠环-磷酸腺苷

脂肪酸合成酶检测试剂盒2,4-二氯甲苯 99%纳米四氧化三铁 99.5%,20nm 球形ANG  大鼠血管紧张素

脂肪酸结合蛋白2检测试剂盒D-葡萄糖酸钠 AR,99.0%纳米四氧化三铁 99%,20nm 球形Bcl-2  大鼠Bcl-2

脂褐质检测试剂盒D-葡萄糖酸内酯 99%纳米铁酸镍 30nm 球形 纯度>99.5%P-Cadherin  大鼠P-钙粘附蛋白

脂联素检测试剂盒葡萄糖酸内酯 USP级纳米氧化镁 50nm,球形,99.9% ls basisCalcitonin  大鼠降钙素

脂氧素A4检测试剂盒D-葡萄糖酸溶液,49-53 wt. % in H2O氧化钕 40nm 球形,99.5%Ret Endostatin  大鼠内皮抑素

直接胆红素检测试剂盒异铝 CP,97%氧化镍 30nm 球形,99.5%TNF- Alpha  大鼠肿瘤坏死因子-α
流感嗜血杆菌检测试剂盒、荧光PCR法大鼠解旋酶样转录因子(HLTF)酶联免疫吸附测定试剂盒Human RASSF1 (Ras association domain-containing protein 1) ELISA KIT脱酶2抗体

大鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)酶联免疫吸附测定试剂盒Human RHEBL1 (GTPase RhebL1) ELISA KIT磷酸化DNA依赖性蛋白激酶抗体

大鼠血红素氧合酶1(HO-1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human R3HCC1 (R3H and coiled-coil domain-containing protein 1) ELISA KIT防御素α4抗体

大鼠血红素氧合酶2(HO-2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SPDEF (SAM pointed domain-containing Ets tranion factor) ELISA KITDNA损伤结合蛋白1抗体

大鼠血红素(HPX)酶联免疫吸附测定试剂盒Human RTBDN (Retbindin) ELISA KITDNA损伤结合蛋白2抗体

大鼠硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PEAK1 (Pseudopodium-enriched atypical kinase 1) ELISA KITCD299抗体

大鼠类肝素酶(HPA)酶联免疫吸附测定试剂盒Human R3HDML (Peptidase inhibitor R3HDML) ELISA KITC型凝集素结构域家族4成员A抗体

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