肺炎克雷伯菌检测试剂盒荧光PCR法

发布时间:2021-09-01

本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。

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肺炎克雷伯菌检测试剂盒、荧光PCR法

50T

详见说明书

BH-P63789

操作流程:

收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
柱式病毒DNA提取试剂盒、柱式病毒DNAout

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。

使用方法:

一、样品DNA的制备

用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。

二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。

1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。

2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。

3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。

4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。

5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。

6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。

7. NC管中不加任何阳性对照。

8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

胸腺素β10检测试剂盒没食子酸儿茶素没食子酸酯 分析标准品,≥98%二苯亚甲基氨基乙 99%Oxytoxin  大鼠催产素

幽门螺旋杆菌检测试剂盒没食子酸儿茶素没食子酸酯 98%(R)-(-)-2,3-二氨基酸盐酸盐 99%UPAR  大鼠凝血酶受体

多囊肾蛋白1检测试剂盒醋酸棉酚 分析标准品,98%DL-2,3-二氨基酸盐酸盐 99%progesterone  大鼠孕酮

可溶性弹性蛋白片段检测试剂盒醋酸棉酚 98%(HPLC)DL-2,4-二氨丁酸. 98%prolactin  大鼠催乳素

肌球蛋白重链检测试剂盒10-羟基喜树碱 分析标准品,98%L-2,4-二氨基丁酸 98+%Substance P  大鼠P物质

葡萄糖检测试剂盒(-)-莽草酸 分析标准品,≥98%(R)-(-)-3-羟基丁酸乙酯 98%BDNF  大鼠脑衍化神经营养因子

1,25二羟基维生素D检测试剂盒茄尼 分析标准品,≥96%Fmoc-1-氨基环烷羧酸 95%Testosterone  大鼠睾酮

维生素B12检测试剂盒茄尼 95%Fmoc-环亮氨酸 98%PCNA  大鼠增殖核抗原

甜菜碱检测试剂盒松萝酸 98%DL-高丝氨酸 99%BMP-2  大鼠骨形成蛋白-2

胆碱磷酸甘油酯检测试剂盒松萝酸 分析标准品羟基(甲苯磺酰氧代)苯 97%BMP-4  大鼠骨形成蛋白-4

粘蛋白5AC检测试剂盒叶黃素 分析标准品,90%(R)-(-)-5-羟甲基-2-吡咯烷酮 99%GDNF  大鼠神经胶质系衍化神经营养因子

S-腺苷蛋氨酸检测试剂盒叶黃素 75%(S)-(+)-5-羟甲基-2-吡咯烷酮 98%BFGF  大鼠碱性成纤维因子

s腺苷同型半胱氨酸检测试剂盒1,4-双(二苯膦基)丁烷 96%N'-异亚基-2-磺酰 98%HGF  大鼠肝生长因子

胆碱检测试剂盒1,3-双(二苯膦基)烷 97%2-酰基苯甲酸 80 wt.%NE(Humen)  大鼠去甲肾上腺素

免疫球蛋白G抗体检测试剂盒4-二甲氨基吡啶 99%(R)-(-)-1-苯基-1,2-乙二 99%DA  大鼠多巴
肺炎克雷伯菌检测试剂盒、荧光PCR法大鼠免疫球蛋白A(IgA)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PKN1 (Serine/threonine-protein kinase N1) ELISA KIT双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶DYRK2抗体

大鼠免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PPP2R4(Serine/threonine-protein phosphatase 2A activator) ELISA Kit锌指结构蛋白酶20抗体

大鼠免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫吸附测定试剂盒Human METRN(Meteorin) ELISA KitC型凝集素受体CLEC13A抗体

大鼠免疫球蛋白M(IgM)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PAFAH1B1 (Plaet-activating factor acetylhydrolase IB subunit alpha) ELISA KIT双甲基精氨酸水解酶2抗体

大鼠诱导型一氧化氮合成酶(NOS2/iNOS)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PSKH1 (Serine/threonine-protein kinase H1) ELISA KITD酪氨酸激酶衰减蛋白1抗体

大鼠抑制素A(INHA)酶联免疫吸附测定试剂盒Human LAMA3(Laminin subunit alpha-3) ELISA Kit双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶3抗体

大鼠抗利尿激素(ADH)酶联免疫吸附测定试剂盒Human PPME1 (Protein phosphatase methylesterase 1) ELISA KIT肌营养蛋白α抗体
实验注意事项:

1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;

2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;

3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。

4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。

主要服务:DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。

主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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