操作流程:
产品名称
规格
保存
货号
脑膜炎奈瑟菌检测试剂盒、荧光PCR法
50T
详见说明书
BH-P63809
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水（*用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
鸟氨酸氨酰转移酶检测试剂盒2-硝基烷 96%邻苯二甲酸二壬酯(异构体的混和物) 97%MCP-2/CCL8(Human monocyte chemotactic protein 2) ELISA kit 人单核趋化蛋白2
抗酸性磷酸酶5b检测试剂盒1-壬烯 90%邻苯二甲酸二壬酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)MCP-1/CCL2/MCAF(Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor) ELISA kit 人单核趋化蛋白1
乙型肝炎病核心抗体检测试剂盒4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂恶二唑 99%邻苯二甲酸二壬酯 分析标准品Human L-Selectin ELISA kit 人L选择素
髓鞘少树突胶质糖蛋白抗体检测试剂盒2-萘甲 97%邻苯二甲酸二异壬酯 分析标准品，99.5%IL-9(Human Interleukin 9) ELISA KIT 人白介素9
骨保护素配体检测试剂盒1,2-萘醌 95%邻苯二甲酸二异壬酯 99%IL-8/CXCL8(Human Interleukin 8) ELISA KIT 人白介素8
抗鸭甲肝病A型检测试剂盒4-硝基喹啉-N-氧化物 98%异辛 >99.0%(GC)IL-6(Human Interleukin 6) ELISA KIT 人白介素6
程序性死亡配体-1检测试剂盒N-亚硝基二正丁 95%偏苯三酸三辛酯 97%IL-5(Human Interleukin 5) ELISA KIT 人白介素-5
神经源性分化蛋白1检测试剂盒N-亚硝基二正 98%N-叔丁氧羰基-去甲托品酮 98%IL-4(Human Interleukin 4) ELISA KIT 人白介素4
双肾上腺皮质激素检测试剂盒十八烷基异酸酯 75%N-苄基托品酮 97%IL-3(Human Interleukin 3) ELISA KIT 人白介素3
λ干扰素检测试剂盒邻甲苯甲-DNPH 98%18-冠-6 99%IL-2sR Beta (Human Interleukin 2) ELISA kit 人白介素2可溶性受体β链
性别决定区Y框蛋白2检测试剂盒5′-O-(4,4′-二甲氧基三苯甲基)胸苷 98.0%15-冠-5 97%IL-2sR Alpha/CD25(Human soluble interleukin-2 receptor) ELISA kit 人白介素2可溶性受体α链
肿廇蛋白P63检测试剂盒(R)-(+)-1-苯基乙 99%3-乙氧酰基苯甲磺酸盐 98%IL-2(Human Interleukin 2) ELISA kit 人白介素2
可溶性半乳糖凝集素3结合蛋白检测试剂盒1-戊烯 98%2(5H)-呋喃酮 98%IL-1 Alpha (Human Interleukin 1 Alpha) ELISA Kit 人白介素1α
疱疹病-6型感染IgG抗体检测试剂盒1-十五 96%(S)-(-)-β-羟基- 96%IL-1sR II (Human soluble interleukin-1 receptor II ) ELISA kit 人白介素1可溶性受体Ⅱ
神经胶质纤维酸性蛋白检测试剂盒付玫瑰苯 97%(S)-3-羟基四 98%IL-1sR I (Human soluble interleukin-1 receptor ) ELISA kit 人白介素1可溶性受体Ⅰ
大鼠III型前胶原氨基端原肽(PⅢNP)酶联免疫吸附测定试剂盒Human MYNN (Myoneurin) ELISA KIT核酸内切酶G抗体
大鼠白介素3调节D的核因子(NFIL3)酶联免疫吸附测定试剂盒Human NDST1 (Bifunctional heparan sulfate N-deacetylase/N-sulfotransferase 1) ELISA KIT酪氨酸蛋白激酶受体A10抗体
大鼠核因子κB(NF-κB)酶联免疫吸附测定试剂盒Human NRAP (Nebulin-related-anchoring protein) ELISA KIT胞吐囊复合体蛋白2抗体
大鼠核因子κB亚基p65(NF-κB p65)酶联免疫吸附测定试剂盒Human MYRIP (Rab effector MyRIP) ELISA KIT磷酸化4E结合蛋白1抗体
大鼠核受体相互作用蛋白1(NRIP1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human KAT7(Histone acetyltransferase KAT7) ELISA Kit磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体
大鼠核RNA输出因子1(NXF1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human MEAF6 (Chromatin modification-related protein MEAF6) ELISA KIT泛素交联酶抗体
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液，它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
脑膜炎奈瑟菌检测试剂盒、荧光PCR法大鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)酶联免疫吸附测定试剂盒Human NOXO1 (NADPH oxidase organizer 1) ELISA KIT嗜酸性粒过氧化物酶抗体
