本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液，它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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产品名称 |
规格 |
保存 |
货号 |
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鲤春病毒、SVCV检测试剂盒、荧光-PCR法 |
50T |
详见说明书 |
BH-P64363 |
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水（*用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
烟酰检测试剂盒4-硝基-7-哌苯并氧杂恶二唑 98%2-氨基-4，6-二甲基嘧啶 98%
结核菌杆IgM抗体检测试剂盒4-肼基-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂恶二唑 98%2-氨基-4，6-二氯嘧啶 98%
线粒体呼吸链复合物I检测试剂盒1,4-哌二乙磺酸 99%4,6-二甲基-2-巯基嘧啶 98%
N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体A1亚单位NR4检测试剂盒哌-N,N-双(2-羟基烷磺酸) 99%4,6-二氯嘧啶 98%
15脂加氧酶1检测试剂盒苯甲基磺酰氟 ≥98.5% (GC)N,N′-二苯基-N,N′-(3-基)-1,1′-联苯-4,4′-二（TPD）
蓝氏贾第鞭毛虫检测试剂盒对二甲苯二聚体 99%浴铜灵 98%
β-乳球蛋白检测试剂盒对磷酸二钠 98%2-溴芴 97%
Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶2检测试剂盒2,3-二氯甲苯 分析标准品,用于环境分析五氯化磷 99.998%
Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶5检测试剂盒2,5-二氯甲苯 分析标准品邻苯二甲 99%
RNA结合基序蛋白6检测试剂盒3,4-二氯苯 分析标准品2-甲基噻吩 99%
RNA聚合酶转录终止因子Ⅰ检测试剂盒2,2'-二硫双(4-甲基噻唑) 97%噻吩-2-乙酸 98%
R-脊椎蛋白2检测试剂盒地美环素盐酸盐 分析标准品乙酰氧肟酸 98%
S100A11钙结合蛋白检测试剂盒地美环素盐酸盐 ≥90% (HPLC)双(2-氯乙基)盐酸盐 98%
S100A12钙结合蛋白检测试剂盒顺式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸乙酯 90%羧甲氧基半盐酸盐 98%
透明质酸结合蛋白2检测试剂盒盐酸二 99%酸枣仁皂苷 B 分析标准品，≥98%
巨噬来源的趋化因子检测试剂盒乙盐酸盐 98%甘草苷 分析标准品，>99.5%
单核趋化蛋白4检测试剂盒盐酸盐 CP，97.0%千金子二萜 分析标准品，>98%
马尿酸检测试剂盒盐酸盐 98%DL-薄荷 分析标准品
Smad同源物1检测试剂盒盐酸盐 GR,99.5%三七皂甙 R1 分析标准品,≥98% (HPLC)
Smad同源物3检测试剂盒4-甲基水杨酸 99%氯化两面针碱 分析标准品，>98%
Smad同源物7检测试剂盒胆盐乳糖培养基 BR麦冬皂苷D 分析标准品，>98%
鲤春病毒、SVCV检测试剂盒、荧光-PCR法猴冷球蛋白(CG)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human SLC30A8(Zinc transporter 8) ELISA KitMYRIP蛋白抗体
猴生长因子受体结合蛋白10(Grb10)酶联免疫吸附测定试剂盒Human GRIN1(Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 1) ELISA Kit髓磷酯髓鞘蛋白1抗体
猴Apelin 13(AP13)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human SLC25A12(Calcium-binding mitochondrial carrier protein Aralar1) ELISA Kit巨噬克隆激因子抗体
猴核孔蛋白62KDa(NUP62)酶联免疫吸附测定试剂盒Human UBAP2(Ubiquitin-associated protein 2) ELISA Kit膜相关环指蛋白4抗体
猴纤维蛋白原γ(FGγ)酶联免疫吸附测定试剂盒Human FSCN2(Fascin-2) ELISA Kit肌球蛋白轻链激酶抗体
猴β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human REG3γ(RegeneRating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit单纺锤体蛋白激酶1抗体
猴血管紧张素原(AGT)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CDC42(Cell division control protein 42 homolog) ELISA Kit有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白2抗体
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
