本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液，它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。
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产品名称 |
规格 |
保存 |
货号 |
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肉毒杆菌A/B型、CB-A/B检测试剂盒、双重荧光-PCR法 |
50T |
详见说明书 |
BH-P64571 |
操作流程:
收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆信息输入数据库——>质粒实物保存。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水（*用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
聚(ADP核糖)聚合酶1检测试剂盒4-甲酰苯酸 97%盐酸可乐定 98%
乙型肝炎病表面IgG抗体检测试剂盒4-氟苯酸 99%头孢呋辛钠 分析标准品
白介素28D检测试剂盒呋喃-2-酸 98%肉桂基氯 95%
白喉IgG抗体检测试剂盒3-氟吡啶 99%0.98
电压门控通道抗体检测试剂盒2-氟-4-甲氧基苯酸 98%α-氯代肉桂 97%
7-脱氢胆固检测试剂盒5-基-2-甲氧基苯酸 98%头孢噻肟钠 ≥99.5%（HPLC)
瘤病16型E6蛋白检测试剂盒3-氟-4-甲氧基苯酸 98%氯贝特 98%
乙脱氢酶2检测试剂盒甲氧甲酰基亚甲基三苯基膦 98%多烯紫杉 分析标准品，≥99%
乙脱氢酶家族1-A3检测试剂盒甲氧甲酰基三苯基溴化膦 98%多烯紫杉 98%
乙酰CoA羧化酶检测试剂盒甲基三辛基氯化铵 97%大黄素 ≥90% (HPLC)
乙酰CoA羧化酶1检测试剂盒甲基三苯基溴化鏻 98%苦参碱 分析标准品，≥98%
乙酰胆碱检测试剂盒(甲氧基)三苯基氯化磷 98%紫杉 分析标准品，≥98%
乙酰胆碱受体抗体检测试剂盒基三苯基溴化膦 99%紫杉 98%
乙酰胆碱酯酶检测试剂盒四甲基化铵 98%白藜芦 99%
高尔基体膜蛋白检测试剂盒Boc-Ser(Tos)-OMe BRD-果糖-6-磷酸二钠，二水 98%
复合型表皮生长因子样结构域蛋白8检测试剂盒N-叔丁氧羰基-O-苄基-L-苏氨酸 98%2-氟-6-氨基嘌呤 98%
低密度脂蛋白受体相关蛋白2检测试剂盒BOC-O-叔丁基苏氨酸 99.0%D-葡萄糖酸 98%
血红蛋白β亚基检测试剂盒BOC-D-色氨酸 BRΑ-D-五苯甲酸酰吡喃葡萄糖 98%
跨膜受体蛋白Notch-2检测试剂盒N-叔丁氧羰基-O-(2-溴苄氧羰基)-L-酪氨酸 98%D-葡萄糖-6-磷酸 ~1 M in H2O ( 260 mg/ml)
Ⅴ型胶原α2检测试剂盒Boc-O-叔丁基-L-酪氨酸 99.0%β-D-葡萄糖-6-磷酸钠盐 97%
LINGO1检测试剂盒BOC-D-亮氨酸 98%甘脲 98%
肉毒杆菌A/B型、CB-A/B检测试剂盒、双重荧光-PCR法兔早期生长应答蛋白2(EGR2)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CD86 AntibodyPatched/PTCH抗体
兔肌钙蛋白I(Tn-I)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CD86 Antibody(PB0237)前列腺素E合成酶抗体
兔周期素依赖性激酶2(CDK2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-CD8A Antibody(PB0235)过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α抗体
兔富含半胱氨酸型酸性蛋白(SPARC)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CD8A Antibody丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Plk1抗体
兔氨酸氨肽酶(AAP)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CD9 Antibody磷酸化丝/苏氨酸蛋白激酶Plk1抗体
兔核孔蛋白85kda(NUP85)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CDA Antibody亲环蛋白（亲环素）PPIG抗体
兔角蛋白19(CK-19/KRT19)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-CDC123 Antibody磷酸化亲环蛋白（亲环素）PPIG抗体
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
