实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素，经过洗涤后用底物tmb显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成总线终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值，计算样品浓度。
产品名称：PDE4D鸡磷酸二酯酶4D定量试剂盒
英文名称：Chicken PDE4D (Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific) ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：XG-E76243
试剂盒组成及试剂配制 ：
1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。
2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
试剂准备：
1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37oC溶解。
2. 标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
3. 浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。
公司“质量是企业是生命之源”，选购优势如下：
1原装进口抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全：生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
Ube2H抗体
泛素激活酶2H抗体
Ube2G1抗体
泛素蛋白连接酶G1抗体
UBE2E1抗体
泛素蛋白连接酶E1抗体
UBE2E3抗体
泛素蛋白连接酶E3抗体
UBE2E2抗体
泛素蛋白连接酶2E2抗体
UBE2D4抗体
泛素蛋白连接酶D4抗体
UBE2D3抗体
泛素蛋白连接酶D3抗体
UBE2D1抗体
泛素蛋白连接酶D1抗体
UBE2C抗体
泛素蛋白连接酶C抗体
SUMO-1抗体
泛素蛋白连接酶E2I抗体
UBE2D2抗体
泛素蛋白连接酶D2抗体
Ube2G2抗体
泛素蛋白连接酶G2抗体
Ube2L3抗体
泛素蛋白连接酶L3抗体
Ube2N抗体
泛素蛋白连接酶2N抗体
UGCG抗体
葡萄糖神经酰胺合成酶抗体
UEVLD抗体
泛素结合酶E2样蛋白抗体
Uridine Phosphorylase 1抗体
尿嘧啶核苷磷酸化酶1抗体
Utrophin抗体
肌营养不良蛋白相关蛋白1抗体
ULBP1抗体
UL16结合蛋白1蛋白抗体
ULBP2抗体
UL16结合蛋白2抗体
UGP2抗体
尿苷酰二磷酸葡萄糖焦磷化酶2抗体
UQCRFS1抗体
质子梯度调节蛋白1抗体
UBTD1抗体
泛素结构域蛋白1抗体
Unrip抗体
丝氨酸/苏氨酸激酶受体相关蛋白抗体
UQCRC2抗体
线粒体辅酶细胞色素C还原酶核心蛋白2抗体
UTF1抗体
未分化胚胎干细胞转录因子1抗体
Urotensin II抗体
尾加压素2抗体
UTS2D抗体
尾加压素2相关肽抗体
UBAP1抗体
泛素相关蛋白1抗体（鼻咽癌相关基因20蛋白）
Ubiquitously expressed tran
抗体 广泛表达转录蛋白UXT抗体
Ubiquitin D抗体 泛素D抗体
UROD抗体 尿卟啉原脱羧酶抗体
操作流程：
1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
2酶标板置4℃，包被*。
3洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后，即甩去，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
6洗板，同4。
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
9洗板，同4。
10每孔加tmb显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差w1-w2，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理：在得出标本s和阴性对照n的 od值后，计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。
