实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素,经过洗涤后用底物tmb显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成总线终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值,计算样品浓度。
产品名称:UGCG鸡尿苷二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶进口ELISA试剂盒
英文名称:Chicken UGCG (UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:XG-E76223
试剂盒组成及试剂配制 :
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
试剂准备:
1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。
2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。
公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:
1原装进口抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
SHP1抗体
蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗体
PI 3 Kinase Class 3抗体
磷脂酰肌醇激酶3催化亚单位3抗体
phospho-PIK3C3抗体
磷酸化磷脂酰肌醇激酶3催化亚单位3抗体
phospho-PRKCQ抗体
磷酸化蛋白激酶C theta抗体
PI 3 Kinase p85 beta抗体
磷脂酰肌醇激酶p85β抗体
phospho-PIK3R2抗体
磷酸化磷脂酰肌醇激酶p85β抗体
phospho-PPM1A抗体
磷酸化蛋白磷酸酶2C亚型α抗体
P2X2抗体
三磷酸腺苷受体受体P2X2抗体
Protein CASP抗体
CASP抗体
PIM1+PIM3抗体
丝氨酸/苏氨酸激酶蛋白PIM1+PIM3抗体
PACSIN3抗体
胞浆蛋白PACSIN3抗体
PAG1抗体
跨膜接头蛋白PAG抗体
PARD6G抗体
PARD6G蛋白抗体
PL6抗体
胎盘蛋白6抗体
PIK3AP1抗体
磷酸肌醇3激酶接头蛋白1抗体
PRAM1抗体
PRAM1蛋白抗体
Pan Cytokeratin/p-CK抗体
广谱细胞角蛋白PCK抗体
phospho-PARK2抗体
磷酸化帕金蛋白抗体
Phospho-PDGF Receptor beta 抗体
磷酸化血小板源性生长因子受体B抗体
PAK6抗体
P21蛋白激活的蛋白激酶6抗体
phospho-PAK6抗体
磷酸化P21蛋白激活的蛋白激酶6
PTPRA抗体
酪氨酸磷酸酶α抗体
PTPN7抗体
非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗体
phospho-PTPN7 抗体
磷酸化非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗体
PKC mu抗体
蛋白激酶C mu型抗体
PAI-1抗体
纤溶酶原激活物抑制因子抗体
Pepsinogen II抗体
胃蛋白酶原C抗体
Profilin 1抗体
前纤维蛋白1抗体
UGCG鸡尿苷二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶进口ELISA试剂盒phospho-PAK1抗体
磷酸化p21激活激酶1抗体
Phospho-PLC gamma 1抗体
磷酸化磷酯酶Cγ1抗体
phospho-PKC beta 1/2抗体
磷酸化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)抗体
PGRMC抗体
孕激素受体膜相关元件抗体
操作流程:
1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
2酶标板置4℃,包被*。
3洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后,即甩去,之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
6洗板,同4。
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
9洗板,同4。
10每孔加tmb显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,终测得的od值为两者之差w1-w2,以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理:在得出标本s和阴性对照n的 od值后,计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。