实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素,经过洗涤后用底物tmb显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成总线终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值,计算样品浓度。
产品名称:FN鸡纤维连接蛋白ELISA试剂盒
英文名称:Chicken FN (Fibronectin) ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:XG-E76074
试剂盒组成及试剂配制 :
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
试剂准备:
1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。
2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。
公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:
1原装进口抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
DMC1抗体
减数分裂同源蛋白DMC1抗体
DNA Ligase III抗体
DNA连接酶3抗体
phospho-DNA PKcs 抗体
磷酸化DNA依赖性蛋白激酶抗体
DNA polymerase delta p50抗体
DNA聚合酶δ2/DNA pol δ 2抗体
DNA Polymerase delta, catalytic subunit抗体
DNA聚合酶δ催化亚单位/DNA pol δ cat抗体
DNA polymerase eta抗体
DNA聚合酶η抗体
DNA Polymerase gamma抗体
DNA聚合酶γ/DNA pol γ抗体
DNA Polymerase iota抗体
DNA聚合酶ι/DNA pol ι抗体
DNA Polymerase Kappa/POLK抗体
DNA聚合酶κ/DNA pol κ抗体
DNA Polymerase lambda抗体
DNA聚合酶λ/DNA pol λ抗体
DNA polymerase mu抗体
DNA聚合酶μ/DNA pol μ抗体
DNAJA2抗体
细胞周期蛋白3抗体
DNAJC9抗体
DNAJC9蛋白抗体
Dnmt2抗体
DNA甲基转移酶2抗体
Dnmt3L抗体
DNA甲基转移酶3L抗体
DPP10抗体
二肽基肽酶10抗体
DPP3抗体
二肽氨基肽酶3抗体
DREF抗体
DNA复制相关元件结合因子抗体
DRIL1抗体
B淋巴细胞转录调节相关蛋白DRIL1抗体
DRIP130抗体
转录共激活因子130抗体
Drosha抗体
核糖核酸酶3/Drosha抗体
DTYMK抗体
脱氧胸苷酸激酶DTYMK抗体
DUSP10抗体
双特异性蛋白磷酸酶10抗体
DUSP5抗体
双特异性蛋白磷酸酶5抗体
phospho-Dynamin 1 抗体
磷酸化酶动力蛋白1抗体
Dynamin 1抗体
酶动力蛋白1抗体
Dynorphin A抗体
脑啡肽A抗体
DMWD抗体
强直性肌营养不良相关蛋白9抗体
DYX1C1抗体
DYX1C1蛋白抗体
DZIP3抗体
E3泛素蛋白连接酶dzip3抗体
DDX23抗体
三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX23抗体
DPPA5抗体
多能发育相关基因5抗体
DDX3抗体
三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX3抗体
phospho-DDX3抗体
磷酸化三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX3抗体
Dymeclin抗体
迪格弗-梅尔基奥尔-克劳森综合征相关蛋白抗体
DUOXA2抗体
双氧化酶激活因子2抗体
DZIP3抗体
RNA结合泛素连接酶DZIP3抗体
AKR1C1抗体
二氢二醇脱氢酶1/2抗体
FN鸡纤维连接蛋白ELISA试剂盒DAAM2抗体
形态发生紊乱关联激活因子2抗体
DOCK2抗体
细胞质分裂付出蛋白2抗体
操作流程:
1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
2酶标板置4℃,包被*。
3洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后,即甩去,之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
6洗板,同4。
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
9洗板,同4。
10每孔加tmb显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,终测得的od值为两者之差w1-w2,以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理:在得出标本s和阴性对照n的 od值后,计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。