实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素，经过洗涤后用底物tmb显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成总线终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值，计算样品浓度。
产品名称：DKK1鸡Dickkopf相关蛋白1 免费代测
英文名称：Chicken DKK1 (Dickkopf Related Protein 1) ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：XG-E75982
试剂盒组成及试剂配制 ：
1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。
2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
试剂准备：
1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37oC溶解。
2. 标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
3. 浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。
公司“质量是企业是生命之源”，选购优势如下：
1原装进口抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全：生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
alpha Adaptin抗体 衔接蛋白α-Adaptin抗体
APAF1抗体 凋亡蛋白活性因子-1抗体（C端）
APAF1抗体 凋亡蛋白活性因子-1抗体（N端）
ABCG2抗体 三磷酸腺苷结合转运蛋白G家族成员2抗体
Amyloid Precursor Protein抗体 淀粉样肽前体蛋白抗体
AGT抗体 血管紧张素原抗体
Androgen receptor抗体 雄激素受体抗体
AVEN抗体 细胞死亡调节蛋白抗体(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制剂)
Axin1抗体 轴蛋白1抗体
ATG9B抗体 自噬相关蛋白9B抗体
Apg12抗体 自噬相关蛋白12抗体
ATG13抗体
DKK1鸡Dickkopf相关蛋白1 免费代测自噬相关蛋白13抗体
ATG3抗体 自噬相关蛋白3抗体
ADAMTS4抗体 整合素样金属蛋白酶与凝血酶4型抗体
phospho-Amyloid Precursor Protein 抗体 磷酸化APP(Tyr757)淀粉样肽前体蛋白抗体
ACTR抗体 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ATR抗体
ADAM18抗体 去整合素样金属蛋白酶18抗体
ATF6抗体 活化转录因子6抗体
AP2 beta抗体 衔接蛋白β抗体
Gamma-Adaptin抗体 衔接蛋白γ/γ-Adaptin抗体
AQP9抗体 水通道蛋白-9抗体
Annexin A3抗体 膜粘连蛋白A3抗体
Annexin IV抗体 膜粘连蛋白 A4抗体
APG8A抗体 自噬相关蛋白8A抗体
APOBEC3G抗体 脱氧胞苷脱氨酶蛋白抗体
AKAP13抗体 蛋白激酶锚定蛋白13抗体
AP1M2抗体 AP-1μ2抗体
Allergin-1抗体 肥大细胞膜抑制性受体Allergin1抗体
ACCN1抗体 脑钠通道蛋白1抗体
ARP2/3 subunit 1B抗体 肌动蛋白相关蛋白2/3复合亚单位B1抗体
ATM抗体 毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体
ABCF2抗体 ATP结合盒转运蛋白2抗体
ABLIM3抗体 肌动蛋白结合蛋白LIM蛋白3抗体
操作流程：
1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
2酶标板置4℃，包被*。
3洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后，即甩去，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
6洗板，同4。
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
9洗板，同4。
10每孔加tmb显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差w1-w2，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理：在得出标本s和阴性对照n的 od值后，计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。
