PACAP-27豚鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽27定量试剂盒

实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素，经过洗涤后用底物tmb显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成总线终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值，计算样品浓度。
产品名称：PACAP-27豚鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽27定量试剂盒
英文名称：Guinea pig PACAP-27 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 27) ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：XG-E74905

试剂盒组成及试剂配制 ：

1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。

2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

试剂准备：

1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37oC溶解。

2. 标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

3. 浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。

公司“质量是企业是生命之源”，选购优势如下：

1原装进口抗体——、灵敏、特异

2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高

3的优化方案——回收利用率高、可靠性强

4适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。

IL-31 白细胞介素31抗体
IL-28A/IFNL2 白细胞介素28A抗体
IL-32/NK4 白介素32抗体
IL-33/NFHEV 白介素33抗体
ILT2/CD85j 细胞表面免疫球蛋白样转录因子2抗体
Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗体
Integrin alpha 2b/CD41 血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗体
IL-17RC/IL-17RL 白介素17受体C抗体
IGSF8 免疫球蛋家族成员8抗体
IL-33 白介素33抗体
Importin 9 核蛋白9抗体（Ran结合蛋白M）
eIF3A 真核翻译起始因子3A抗体
phospho-eIF4G (ser1185) 磷酸化真核翻译起始因子4G抗体
Integrin alpha 4+Beta 7 整合素α4β7抗体
phospho-IRF3 (Ser386) 磷酸化干扰素调节因子3抗体
ISLR2 ISLR2蛋白抗体
IQCG IQCG蛋白抗体
IQCK IQCK蛋白抗体
Id1 DNA结合抑制因子1抗体
IMPDH1 肌苷单磷酸脱氢酶1抗体
IFI78 干扰素诱导蛋白P78抗体
ICAM5 细胞间粘附分子5抗体
IMPAD1 肌醇单磷酸酶IMPA3抗体
Integrin Alpha V + Beta 6 整合素αVβ6抗体
IL-11RA 白介素11受体α/IL-11Rα抗体
ILDR1 免疫球蛋白样结构域受体1抗体
IKK Alpha + IKK beta KB抑制蛋白激酶α/β抗体 IKK α/IKK β
Interferon alpha 11 干扰素α11抗体
IFNA10 干扰素α10抗体
IFNAR2 干扰素α受体2抗体
IFNA21 干扰素α21抗体
IFNA4 干扰素α4抗体
Interferon alpha 16 干扰素α16抗体
ITIH1 衍生透明质酸相关蛋白抗体
INPPL1 肌醇聚磷酸盐磷酸酶样蛋白1抗体
Insig2 胰岛素诱导基因2抗体
IHH HHG2抗体
Interferon alpha 17 干扰素α17抗体
IL1RAPL2 白介素1受体9抗体
IQGAP3 RasGTP酶激活蛋白IQGAP3抗体

操作流程：1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
2酶标板置4℃，包被*。
3洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后，即甩去，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。 
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
6洗板，同4。 
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
9洗板，同4。 
10每孔加tmb显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。 
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差w1-w2，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理：在得出标本s和阴性对照n的 od值后，计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。