DKK4猴Dickkopf 相关蛋白4检测试剂盒

发布时间:2021-12-08

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素,经过洗涤后用底物tmb显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成总线终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度od值,计算样品浓度。
产品名称:DKK4猴Dickkopf 相关蛋白4检测试剂盒
英文名称:Monkey DKK4 (Dickkopf Related Protein 4) ELISA Kit 
规格:48T/96T
货号:XG-E70857


试剂盒组成及试剂配制 :

1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。

2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。

3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)

8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

试剂准备:

1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。

2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。

α1-AGP人α1酸性糖蛋白elisa Kit

公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:

1原装进口抗体——、灵敏、特异

2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高

3优化方案——回收利用率高、可靠性强

c20orf78 20号染色体开放阅读框78抗体 
C20orf187 20号染色体开放阅读框187抗体 
C21orf59 21号染色体开放阅读框59抗体 
C20orf152 20号染色体开放阅读框152抗体 
C20orf165 20号染色体开放阅读框165抗体 
C20orf166 20号染色体开放阅读框166抗体 
C20orf173 20号染色体开放阅读框173抗体 
C20orf24 20号染色体开放阅读框24抗体 
C20orf30 20号染色体开放阅读框30抗体 
C20orf4 20号染色体开放阅读框4抗体 
C20orf7 20号染色体开放阅读框7抗体 
C20orf79 20号染色体开放阅读框79抗体 
C20orf94 20号染色体开放阅读框94抗体 
C21orf37 21号染色体开放阅读框37抗体 
C22orf15 22号染色体开放阅读框15抗体 
C22orf13 22号染色体开放阅读框13抗体 
C22orf26 22号染色体开放阅读框26抗体 
C2b 补体C2b链多肽抗体 
C2orf16 2号染色体开放阅读框16抗体 
C2orf27 2号染色体开放阅读框27抗体 
phospho-delta 1 Catenin (Ser268) 磷酸化δ连环蛋白抗体 
phospho-delta 1 Catenin (Thr310) 磷酸化δ连环蛋白抗体 
phospho-delta 1 Catenin (Thr916) 磷酸化δ连环蛋白抗体 
DKK4猴Dickkopf 相关蛋白4检测试剂盒phospho-delta 1 Catenin (Tyr228) 磷酸化δ连环蛋白抗体 
phospho-delta 1 Catenin (Tyr291) 磷酸化δ连环蛋白抗体 
phospho-delta 1 Catenin (Tyr96) 磷酸化δ连环蛋白抗体 

操作流程:

1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 

2酶标板置4℃,包被*。
3洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后,即甩去,之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。 
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
6洗板,同4。 
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
9洗板,同4。 
10每孔加tmb显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。 
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,终测得的od值为两者之差w1-w2,以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理:在得出标本s和阴性对照n的 od值后,计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。



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