液相色谱广泛应用于各种领域的样品分析测定,其中C18色谱柱可以分析绝大多数的化合物,是一款常用且入门的高效色谱柱。柱子在使用中,日常的维护和活化该如何去做呢?恒谱生带大家了解!
恒谱生建议在使用一款新的液相色谱柱前,*进行柱性能试验,记录试验条件和结果,作为今后评价柱性能变化的参考。柱效对于分析色谱柱是一个非常重要的考虑因素,想要分析结果好就一定要好好保养液相色谱柱,维护它的高柱效。测试时要注意:你的测试环境与条件应该按照hplc色谱柱出厂报告中的条件进行,这样测得的结果才有可比性。
分析样品前要对色谱柱进行平衡,等到基线平稳后再进样分析,一般花30分钟用流动相平衡就可以了。 新液相色谱柱使用前根据自己柱子的特性选择合适的试剂将柱子中保存试剂清洗出来,特别需要注意清洗用的溶剂与保存的溶剂相溶性。
日常使用完色谱柱后,一定要注意清洗!实验分析时如果使用含盐的流动相,结束后需要用含10%的甲醇的流动相冲洗30分钟,洗掉色谱柱中残留的盐,再用甲醇冲洗30分钟。特别注意:不能用纯水冲洗柱子,防止将填料冲塌陷。
新买的液相色谱柱需要活化,不同的柱子活化的方法也不同。举例*常用的c18色谱柱活化可以用0.5ml/min流速的甲醇冲洗2小时以上。柱子内有保存液,用甲醇冲洗掉柱中可能残留的其他杂质,以免影响后续分析工作。活化的好处有很多,能排除有机相挥发所产生的起泡。C18柱是键合了c18的,用甲醇冲活化c18柱能使键合更好的排列,更有利于分析测定。柱子在活化时*不要接检测器,这样可以避免不必要的化学污染。
hplc色谱柱是比较昂贵的色谱耗材,想要长久的使用下去,日常就需要注意保养。想要延长色谱柱使用寿命,可以选择色谱保护柱,过滤掉系统内部和样品残留的污染物。大多数的反相色谱柱有自己的ph使用范围,像恒谱生反相色谱柱ph范围在2-8之间,尽量不要过这个范围去使用,避免对柱子造成损伤。