广东湛江市廉江市第三方仪器校准机构*校正

发布时间:2022-03-17

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3.6 培养基的杀菌

3.6.1 孟加拉红琼脂的杀菌

将分装完毕的营养琼脂,放在杀菌釜内,摆放好。然后关上杀菌釜,打开电源,升温到80时,打开放气阀进行放气,带放气阀门喷出大量水蒸气时关上放气阀。升温至121开始计时,杀菌30min停止加热,进行自然冷却,待压力回归零时,打开放气阀门进行放气。等待杀菌釜内气压全部排净完后打开杀菌釜,将生理盐水取出送往微生物操作间预处理间的水浴锅,进行保温,水浴锅的温度46士1


3.6.2 乳糖胆盐肉汤的杀菌

将分装完毕的乳糖胆盐发酵管,放在杀菌釜内,摆放好。然后关上杀菌金,打开电源,升温到80时,打开放气阀进行放气,带放气阀门喷出大量水蒸气时关上放气阀。升温至121开始计时,杀菌30min停止加热,进行自然冷却,待压力回归零时,打开放气阀门进行放气。等待杀菌釜内气压全部排净完后打开杀菌釜,将生理盐水取出送往微生物操作间的小窗内。


3.7 培养皿和吸量管的杀菌

培养皿将培养基处理完,用84消毒液浸泡30min后,用洗洁精清洗干净后用干燥箱烘干(160、30min)后,用牛皮包扎好,在160干热杀菌2小时。1mL的吸量管也用84消毒液浸泡30min后,用洗洁精清洗干净后用干燥箱烘干(160、30min)后,用牛皮纸包扎好,在160干热杀菌2小时。


3.8 器具和设备灭菌

3.8.1 湿热灭菌:采用高压灭菌器,121灭菌20min,适用于玻璃器皿、移液器吸头、塑料瓶等按照GB 15981的规定,评价高压灭菌器的杀菌效果。


3.8.2 干热灭菌:采用干燥箱灭菌,160灭菌2h,180灭菌1h,适用于玻璃器皿,不锈钢器具等。


3.8.3 液体消毒剂消毒:使用适当浓度的自配或商业液体消毒剂对工作台面、器具或设备表面进行消毒。可按照GB 15981的规定,评价自配或商业消毒剂的消毒效果;可按照ISO 18593,监测工作台面、器具或设备表面的消毒效果。

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4.1 实验前准备

4.1.1 无菌操作台和微生物操作间杀菌消毒。

每次做实验之前,用75%的酒精对无菌操作台和微生物操作间进行喷洒消毒,然后开启无菌操作台上面的紫外灯对无菌操作台杀菌30min以上。同时,开启微生物操作间紫外灯对空气杀菌消毒30min以上。


4.1.2 微生物检验人员的工作服、帽、口罩和鞋子的杀菌。微生物检验人员的工作服、帽、口罩和鞋子在实验之前,在微生物操作缓冲间用紫外灯杀菌30min以上。操作人员在进入微生物操作间时,先用香皂清洗手,然后用消毒好的毛巾擦干手,再用75%的酒精对手进行喷洒杀菌。


4.1.3 营养琼脂和孟加拉红培养基外表面的杀菌。

营养琼脂培养基在拿进微生物操作间时,先用75%的酒精喷酒消毒,因为锥形瓶外表面容易长菌,同时在打开锥形瓶塞是用酒精灯对瓶塞外表烤边进行杀菌。微生物操作时,倒平板时,培养皿应该靠近酒精灯,同时每次对锥形瓶口烤下。


4.1.4 乳糖胆盐发酵口和样品的口杀菌。


     (三)周期强检的仪器计量

    根据相关的计量法规,由强检计量的机构按照规程进行周期确定,在两次校准之间对计量器具运行加强检查,使用具有可信度且适当的方式对正在使用的计量器进行检查,在两次校准的间隔时间内,就是运行检查,这种检查方式能够基木辨别计量器具的工作状态是否良好。

    三、调整仪器校准的周期

    在确定仪器校准周期以后,要*行若干周期的试用,再考核,考核办法就看统计周期的合格率是否是规定的范围以内,如果在范围内,认定评定合理,如果不在范围中,视为周期评定不够合理,也能够依照计量的器具抽检的合格率对周期评定合理与否进行考核。

    能够依照实际的周期检查合格率对周期合理性进行分析,偏长还是过短。很明显的,周期偏长即可缩短,偏短就要适当的加长,调整单位是“月”,通常可以三个月向四个月或者六个月调整,六个月向九个月或者十二个月调整,十二个月向十八个月或者二十四个月调整,缩短周期也是如此。

    对仪器计量设备管理和是一项严格的任务,各方面都应该加以关心与重视,要坚持改革并勇于探索,通过不断地实践去适应新形势的发展需要,使管理仪器计量的工作更有效。

  

5.1 对于培养物及其污染的物品(如斜面,用过的吸量管、细菌培养皿等),应使用适当浓度的自配或商业液体消毒剂(参照D.1)对处理后一定时间,或121高压灭菌至少30min,或者其他有效处理措施。将处理物倒入特殊标识的垃圾袋内,直接送到地

点。

5.2 对于实验动物及相关废弃物,按照GB 14925的规定进行处理。

5.3 记录并保留废弃物和处理的记录。

6.1 菌落数的计数

可用肉眼观察,必要时用放大镜,记录稀释倍数和相应的菌落数量。

选取南落数在30CF∪到300CFU之间、无基延菌落生长的平板计数菌落数,低于30CFU平板记录具体菌落数,大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。

其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数:若状菌落不到平板的一半,而其余一半菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。


6.2 菌落数的计算方法

若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每g(mL)样品中菌落数的结果。

若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内,按公式计算。

若所有稀释度的平板上菌落数大于300CFU,则对稀释度*的平板进行计数,其他平板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以*稀释倍数计算。

若所有稀释度的平板上菌落数小于30CFU,则应按稀释度*低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。

若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小于1乘以*低稀释倍数计算。

若所有稀释度的平板上菌落数均不在30CFU300CFU之间,其中一部分小于30CFU或大于300CFU,则以*接近30CFU或300CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。


6.5 霉菌和醇母菌菌落数的计算方法

计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释信数计算。

若所有稀释度的平板上菌落数均大于300CFU则对稀释度*的平板进行计数,其他平板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以*稀释倍数计算。

若所有稀释度的平板上菌落数小于10CFU,则应按稀释度*低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。

若所有稀释度(包括液休样品原液)平板均无菌落生长,则以小于1乘以*低稀释倍数计算:如为原液,则以小于1计数。


6.6 霉菌和酵母菌菌落数的报告

菌落数在100以内时,按“四舍五入”原则修约,采用两位有效数字报告。

菌落数大于或等于100CFU时,第3位数字采用“四舍五入”原则修约:取前2位数字,后面用0代替位数也可用10的指数形式来表示,按“四舍五入”原则可。采用两位有效数字。


6.3 菌落数的报告

菌落数小于100CFU时,按照“四舍五入”原则修约,以整数报告。

菌落数大于或等于100CFU时,第3位数字采用“四舍五入”原则修约:取前2位数字,后面用0代替位数:也可用10的指数形式来表示,按“四舍五入”原则修约后,采用两位有效数字。

若所有平板上为蔓延菌落而无法计数,则报告菌落蔓延。

若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。


6.4 霉菌和醇母菌计数

可用肉眼观察,必要时用放大镜,记录稀释倍数和相应的菌落数量。

选取菌落数在10CFU到150CFU的平板、根据菌落形态分别计数霉菌和醉母数。霉菌蔓延生长覆盖整个平板的可记录为多不可数。菌落数应采用两个平板的平均数。

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实验室地址

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江苏省苏州市昆山开发区昆嘉路379号

重庆世通:重庆市北碚区万宝大道1843

各分部地址

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