如何选择内参？
要检测一个基因是否有表达，或者比较表达水平的变化，*方式是Western Blot。因为Western Blot操作相对简单，既可以定性分析表达产物，还可以检测目的蛋白量的相对变化。在实验中，可能存在蛋白浓度测定不准确，或者蛋白质样品在上样时产生的操作误差。特别表达量不高时，蛋白定量或上样的误差很有可能影响结果的分析。
为了校正这个误差，Western Blot实验都需要进行内参检测。具体校正方法就是将每个样品目的含量与内参含量相除，得到每个样品目的蛋白的相对含量。再进行样品与样品之间的比较。
内参抗体种类很多，比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、Lamin B等，那么针对自己的实验，我们该如何选择呢?下面简单介绍下选择内参抗体应遵循的原则：
1.样本种属来源
首先要考虑的就是实验样本来源于什么物种。
(1)哺乳动物的组织或者细胞样本，通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、Na,Katpase等。
(2)植物来源实验样本，则可以选择plant actin、Rubisco等。
(3)其他来源样本研究较少，所以就应该参照文献报导，选择合适的蛋白作为内参。
2.目的蛋白分子量
选择内参抗体时，应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的蛋白与内参蛋白分子量相差5KD以上。比如目的蛋白分子量为45KD，此时不适宜选择β-actin作为内参，可以考虑选择GAPDH或者β-tubulin作为内参。
3.目的蛋白表达部位
就一般的蛋白检测来说，β-actin、β-Tubulin抗体等就可以了，而针对于核蛋白的定量，特别是样本蛋白就是核蛋白时，选择恰当的核蛋白内参则更能体现内部参照的价值。常用的核内参抗体有Lamin A、Lamin B、Histone H3，除此之外，其它常见的核蛋白内参还有PCNA、K70、K80等，在一些文献报道中，Erk2、TATA binding protein(TBP)以及c-Jun、c-Fos等都有使用。而对于膜蛋白检测，常用的内参抗体为Na,K ATPase。对于线粒体蛋白的检测，常用VDAC1和COX IV作为内参抗体。
