U-９３７细胞单核细胞系是从美国类型培养样品库（American Type Culture CollectionATCC）获得的，并于加有１０％加热灭活的胎牛血清、２mM左旋谷氨酸、２５０U/ml青霉素和２５０ug/ml链霉素的RPMI１６４０培养基（Gibco产品）制成悬浮液（２x１０５到２x１０６）。整个实验使用的都是从ATCC获得的人类巨细胞病毒（HCMV）的AD１
６９实验室株。这一病毒在人类胚胎肺细胞（MRC－５细胞）中进行扩增，采集为细胞相关的。人类巨细胞病毒（HCMV）的计数通过MRC－５细胞的噬菌斑分析而获得。为了增加感染率，我们将５x１０５U-９３７细胞用聚凝胺（２ug/ml）置于５mlRPMI培养基中预处理２０分钟。然后将细胞进行离心分离，并重新悬浮于0.5ml无细胞的AD１６９病毒株中以1.0的多重感染指数（MOI）维持三小时。然后将细胞进行再次离心，以除去未结合的病毒，用新鲜培养基冲洗三遍后再次进行离心，然后再次悬浮于新鲜培养基中。在２４小时的间隔期内，细胞受到病毒攻击，并在新鲜培养基中再次悬浮。在其中的一些实验中，培养基中含有不同浓度的甘草甜素，环孢霉素A和肿瘤坏死因子α，下面将进一步解释。这样，在多种培养基中，多次进行离心和用新鲜培养基悬浮，使细胞得到清洗。0.1MOI的AD１６９株还被接种于１－打兰培养瓶中，后者带有１２毫米直径的铺有一层MRC－５细胞的盖玻片。将培养瓶在室温下以７００g进行离心，然后培育三小时，以磷酸盐缓冲液（PBS）清洗三次以除去为结合的病毒，然后在３７℃下培育４８小时。培育后，将培养瓶用MicroTrak巨细胞病毒培育鉴定试剂染色（CAPalo AltoSyva公司生产）。感染的MRC－５细胞的比例通过间接免疫荧光分析方法（IFA）检测〔８〕。在含有甘草甜素，环孢霉素A和肿瘤坏死因子α的培养与作为对照的（不含药物的AD１６９接种的U-９３７细胞）培养中，免疫荧光染色人类巨细胞病毒（HCMV）早期抗原（IEA）和早期抗原（EA）阳性细胞的比例被进行了比较。
