酶联免疫吸附测定,又称为ELISA。其原理是根据抗原抗体的特异性结合对待测物质进行定性定量分析。酶标板有透明(比色,测吸光值)、黑色(测荧光发光)、 白色(测化学发光)三种颜色,采用聚苯乙烯制成。
聚苯乙烯可塑性强,有良好的光学可视性,背景吸光度和荧光值低,表面可修饰性强,易于吸附生物大分子。酶标板使用后,清洗再次使用的话会影响检测结果准确性,所以一般是一次性使用。根据ELISA试剂盒不同的分类标准,酶标板有着不同的分类。
1、根据孔数,ELISA试剂盒酶标板关键分类酶标板关键分类可分为96孔、48孔等,由于酶标板是协作酶标仪用,现在市面上的酶标仪有48孔和96孔,但酶标板常用的是96孔。
2、根据其底部的不同,又分为平底的,U型底、V型底等。平底的折射率低,适于在酶标仪检测;U型底的酶标板折射率较高,便当加样、吸样、混匀等操作,可以不用放在酶标仪上,直接通过目测调查色彩改动状况,然后断定有无相应的免疫反应。V底的酶标板可以的汲取样品。
3、根据酶标板与蛋白和其它分子结合才干的不同,又分为高结合力、中结合力和氨基化等。
(1)、高结合力
此种酶标板,表面经处理后,其蛋白结合才干大大增强,可达300~400ng IgG/cm2,结合的蛋白分子量>10kD。运用该类酶标板可进步敏感性,并可相对减少包被蛋白的浓度和用量,不足之处为较易发生非特异性反应。抗原或抗体包被后,以非离子去污剂无法有效地封闭未结合蛋白的部位,需运用蛋白作为封闭剂。
(2)、中结合力
此类酶标板经表面疏水键与蛋白结合,适宜作为分子量>20kD的大分子蛋白的固相载体,其蛋白结合才干为200~300ng IgG/cm2。由于该类酶标板所具有的仅与大分子结合的特性,适用于作为未纯化抗体或抗原的固相载体,可下降潜在的非特异性穿插反应。该类板可以慵懒蛋白或非离子去污剂作为封闭液。