ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。
在检测时,受检标本(测定其中的抗原)与固相载体表面的抗体反应。洗涤后加入酶标记的抗体,通过反应结合在固相载体上。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
ELISA试剂盒品种繁多,多样,使得科研者和经销商在选购时眼花缭乱;ELISA试剂盒有好有坏,有真有伪,更让我们无从下手。现将区别好坏ELISA试剂盒的四个办法结如下:办法一:
选定一个检测范围内的浓度做多孔重复,可看出平行性好不好。即板内CV值的大小,此操作时需求当心加样的性。对一些制造较粗糙的试剂盒来说,板间CV值是较大的。
办法二:
可选用已知浓度的重组细胞因子,稀释到检测范围内作为样本参加,看检测的性。
办法三:
对用待测目标的重组细胞因子做试剂盒说明书上的*小浓度稀释,可测出灵敏度,主张5个复孔以上才有含义。一般厂家以20个复孔做出的成果作为检测限。用此实验可验证出所购试剂盒的灵敏度是否如说明书所述,也可判别出所购试剂盒是否有夸张之说。
办法四:
如果有相同目标的试剂盒,可用对方的标准品作为样本,分别参加各自的试剂盒做检测,以检测试剂盒的真实性,性。如其中一种是闻名的,比较牢靠的话,可作为标准来验证另一试剂盒的程度。