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细胞培养实验室构建方案
细胞培养实验室的设置
细胞培养实验室与其他一般实验室的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。
细胞培养实验室应分为以下几个区:无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。
无菌操作区
(1)无菌操作室:无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域,尽量能与外界隔离,不能穿行或受其他干扰,一般地理位置在部分。
理想的无菌操作室应划为三部分:
a)*衣室---供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b)缓冲间---位于*衣间与操作间之间,目的是为了*操作间的无菌环境,同时可放置恒温培养箱及某些必需的小型仪器。
c)无菌操作间---于无菌操作、细胞培养。其大小要适当,且其*部不宜过高(不*过2.5m)以*紫外线的有效灭菌效果;墙壁光滑无死角以便清洁和消毒。工作台安置不应靠墙壁,台面要光滑压塑作表面,漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH的观察。
(2)净化工作台:操作简单,安装方便,占用空间小且净化效果很好。一般培养室使用的净化工作台主要有两种: a) 侧流式或称垂直式b)外流式或称水平层流式。
净化工作台工作原理(大致相同) ---通常是将室内空气经粗过滤器初滤,由离心风机压入静压箱,再经空气过滤器精滤,由此送出的洁净气流以一定的均匀的断面风速通过无菌区,从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。
净化工作台应用注意:净化工作台应安装在隔离好的无菌间或清洁无尘的房间内,以免尘土过多易使过滤器阻塞,降低净化效果,缩短其使用寿命。
新安装的或长期未使用的工作台,工作前**对工作台和周围环境用真空吸尘器或不产生纤维的工具进行清洁工作,然后再采用药物灭菌法或紫外线灭菌进行灭菌处理。
使用净化工作台前,应先用75%酒精擦洗台面,并提前以紫外线灭菌灯照射30~50min处理净化工作区内积存的微生物。关闭灭菌灯后应启动风机使之运转两分钟后再进行培养操作。
净化工作区内不应存放不必要的物品,以保持洁净气流流型不受干扰。
动物细胞培养实验室:无菌条件,净化工作室,风淋室,传递窗,过滤器,洁净层流罩,生物柜,*净工作台,紫外灯,电热干燥箱,滤器,抗生素。细胞生长条件:纯水蒸馏器,纯水仪,培养板,培养瓶,CO2培养箱,培养基,血清细胞检测条件:倒置显微镜,酶标仪,微孔板震荡器,高速离心机,移液器。实验室要求:和缓冲间相连,缓冲间内备消毒服装和鞋,口罩等,入内换上;设置1—2台*净工作台;室内空气不流通,有适当的光线,清洁,干燥; 照明用荧光灯为好,消毒用紫外线灯; 侧部可设传递窗,用于物品传递;在室内工作时,动作应轻微。
