酶联免疫试剂盒温度把控

ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型，出现颜色反应。因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定，这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方法。

一、酶联免疫试剂盒温度

  1.试剂盒回温：大多数ELISA检测试剂盒为冷藏保存。从冰箱拿出来后，先不要急于打开试剂盒，要等试剂盒的温度平衡至室温且试剂盒盒表面无冷凝水。检测所用的试剂需充分混匀且溶解后再用。

  2.环境温度的控制：实验室应配备温湿度表，且确保定期计量。根据天气情况设定实验室空调制冷或加温功能，待室温稳定且无干扰的条件下再开始检测流程。选用带温控装置的孵育仪器，如恒温孵育器、恒温培养箱、多功能酶标仪等。注意要提前开启预热。

  大多数试剂盒加样后反应时间较短，环境温度对检测结果会有很大影响，所以控制好环境温度是保证试剂盒检测结果有效的重要因素。

  3.孵育：孵育时要保证温度均匀，防止挥发变干。孵育时使用封板膜，并置于暗处孵育。多块板一起实验时，要平放各板，不要叠放，避免温度扩散的不均匀性或边缘效应。

  二、剩余试剂的妥善保存

酶联免疫试剂盒恢复至室温后，取出要使用的酶标板孔，未使用的酶标板孔应及时放回铝箔袋，加入干燥剂，封紧封口，冷藏保存。切忌将未完全平衡至室温的酶标板放回铝箔袋，因为此时由于温度差，酶标板上会有水汽，不利于稳定保存。