1.避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此,在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。
2.应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。
3.一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。如果你需要反冲色谱柱。选择赛分色谱柱,能够和各大的色谱柱相比较;
4.选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
5.经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右。 (下面列举一些色谱柱的清洗溶剂及顺序,作为参考:硅胶柱以正已烷(或庚烷)、二氯甲烷和甲醇依次冲洗,然后再以相反顺序依次冲洗,所有溶剂都必须严格脱水。甲醇能洗去残留的强极性杂质,已烷使硅胶表面重新活化。反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷(或氯仿)依次冲洗,再以相反顺序依次冲洗。如果下一步分析用的流动相不含缓冲液,那么可以省略后用水冲洗这一步。四氢呋喃与乙腈或甲醇的混合溶液能除去类脂。有时也注射二甲亚砜数次。此外,用乙腈、丙酮和三氟醋酸(0.1%)梯度洗脱能除去蛋白质污染。阳离子交换柱可用稀酸缓冲液冲洗,阴离子交换柱可用稀碱缓冲液冲洗,除去交换性能强的盐,然后用水、甲醇、二氯甲烷(除去吸附在固定相表面的有机物)、甲醇、水依次冲洗。)
6.保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。
7.色谱柱使用过程中,如果压力升高,一种可能是烧结滤片被堵塞,这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进入柱内,使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。在后两种情况发生时,小心拧开柱接头,用洁净小钢将柱头填料取出1~2mm高度(注意把被污染填料取净)再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相(与柱内相同)填满色谱柱,压平,再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到改善,但是很难恢复到新柱的水平。柱子失效通常是柱端部分,在分析柱前装一根与分析柱相同固定相的短柱(5~30mm),可以起到保护、延长柱寿命的作用。通常色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上。大多数以公司以硅胶做为填料的色谱柱,只能在pH=2~9范围内使用。但是成都摩尔科学仪器有限公司提供的赛分一款BR-C18色谱柱,同样是用硅胶做为填料,但是它的PH范围值能够达到(1.5-10.5)。柱子使用一段时间后,可能有一些吸附作用强的物质保留于柱顶,特别是一些有色物质更易看清被吸着在柱顶的填料上。如果需要购买保护分析柱。大家选择成都摩尔科学仪器有限公司提供的赛分保护柱。他们提供的保护柱不管你用的是那个公司的色谱柱都能够很好的保护柱子。联系电话()
成都摩尔科学仪器有限公司提供的产品系列包括:各类食品检测和药品检测涉及的从分析到制备等规格齐全、填料齐全的液相色谱柱、气相色谱柱、 纯化填料、品种规格齐全样品前处理固相萃取柱和免疫亲和柱;检测的色谱柱以及纯化用的系统成套设备和各种填料;同时,成都摩尔科学仪器有限公司也是各色谱柱、仪器的配件耗材(如氘灯、石墨管、单向阀等)、常规实验室消耗品(如针头过滤器(含灭菌器)、过滤膜(含除菌膜)、样品瓶(含顶空瓶)及相关盖垫、 移液器、标准品(食品和环境等)和各种分析检测仪器(如液相色谱仪、气相色谱仪、培养箱、生物安全柜、天平、pH计等综合集成供应商
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