Hs 766T细胞

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英文简称:Hs 766T细胞
产品名称: 胰腺癌细胞 
规格:T25
形态特性:上皮细胞
生长特性:贴壁生长
特征特性:
培养条件:DMEM+10%FBS

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
human Serum IgA 人血清型免疫球蛋白A抗体
Iroquois homeobox protein 3 Irx3蛋白抗体
Intra Acrosomal Protein 精子顶端体蛋白10抗体
human secretory IgA 人分泌型免疫球蛋白A
ICA1 胰岛细胞自身抗原1抗体
Islet 2 胰岛素基因增强结合蛋白2抗体
IL-16 白介素-16抗体
AIF1 离子钙接头蛋白抗体
IRX4 Iroquois同源蛋白4抗体
IFRD1 干扰素相关发育调节蛋白1抗体（神经生长因子诱导蛋白PC4）
ILP2 抑制细胞凋亡样蛋白2抗体
IFITM1 干扰素诱导跨膜蛋白1抗体
IFI44 干扰素诱导蛋白44抗体
ITPR3 5-三磷酸肌醇受体3抗体
IFNW1 干扰素omega 1蛋白抗体
IFNA7 干扰素alpha 7蛋白抗体
IFN-Beta 干扰素β抗体
ID1 DNA结合抑制因子1抗体
IFI-202 γ干扰素诱导蛋白202抗体
intestinal FABP/IFABP/FABP2 肠型脂肪酸结合蛋白抗体
ING1 生长抑制因子基因1抗体
IL-8/CXCL8 白介素8抗体
ILK-1 整合素连接激酶-1抗体
phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗体
Phospho-IKK alpha(Ser180) + IKK beta(Ser181) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗体
Phospho-IKK alpha/beta (Ser176 + Ser180) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗体
IFT46 细胞纤毛内转运同源蛋白46抗体
IL-10RA 白细胞介素-10受体a抗体
Hs 766T细胞IL-13Ra1 白细胞介素-13受体a1抗体
IRGM 免疫相关鸟苷三磷酸酶基因抗体
IL-13Ra2 白细胞介素-13受体a2抗体
I-309 嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗体