一、前言
佐剂是疫苗的一种添加剂,当它先于抗原或与抗原混合注入机体后,能够增强机体对抗原的免疫应答或者改变免疫反应的类型,属于非特异性的免疫增强剂。随着现代生物技术和基因工程技术的迅速发展,针对不同疾病已开展了各种*基因工程疫苗的研制,佐剂尤其是*免疫佐剂的研究就显得尤为迫切。
在标准 T/CVDA02《复合矿物油动物疫苗佐剂》中,对于佐剂的质量检测中有明确规定测定碘值含量,本方法参考其中的检测方法制定了运用电位滴定检测的方法。该方法检测方便,减少了人为判断指示剂颜色对结果的误差影响,增加了检测度,并且提高了检测效率,是检测佐剂碘值的。
二、仪器与试剂
2.1、仪器
JH-T6全自动电位滴定仪,铂复合电极,分析天平等。
2.2、试剂
三氯甲烷,韦氏试剂,碘化钾,硫代硫酸钠标准滴定液(0.1mol/L)。
三、实验方法
3.1、样品检测
准确称取 1.0g 样品,置于滴定杯中,加入三氯甲烷 30mL 溶解,搅拌均匀,向滴定杯中准确加入 10mL韦氏试剂,封口膜密封,暗处放置 1 小时,然后加入 15mL 碘化钾和 10mL 水,在合适的搅拌速度下,插入电极和滴定头,设置好参数,用硫代硫酸钠标准滴定液(0.1mol/L),以铂复合电极为工作电极,在JH-T6上进行滴定至终点。同时做空白实验。
设定滴定仪参数如表 1 所示:
表 1 滴定参数设置
|
滴定模式: |
动态滴定 |
*小添加体积 |
0.02mL |
|
电极平衡时间: |
4s |
预添加体积: |
25mL |
|
电极平衡电位: |
1mv |
滴定速度: |
标准 |
|
结束体积: |
50mL |
相关系数: |
-12.69 |
|
电位突跃量: |
200 |
补液速度: |
5 |
3.2、测试
图谱示例
四、结果与讨论
4.1、实验结果
实验结果如表 2 所示:
表 2 测试结果
|
样品批号 |
样品序号 |
样品质量/g |
滴定液浓度 (硫代硫酸钠)/(mol/L) |
滴定体积/mL |
碘值 (g/100g) |
平均值 |
|
20211201 |
空白 |
/ |
0.1009 |
29.850 |
/ |
/ |
|
1 |
1.00511 |
25.623 |
5.3848 |
5.376 |
||
|
2 |
1.00073 |
25.555 |
5.4954 |
|||
|
3 |
1.00228 |
25.743 |
5.2467 |
|||
|
20220101 |
1 |
1.01762 |
25.968 |
4.8847 |
4.768 |
|
|
2 |
1.00668 |
26.334 |
4.4721 |
|||
|
3 |
1.01217 |
25.939 |
4.9475 |
4.2、结论
本次测试的的动物疫苗佐剂均满足测试结果在 4.0-9.0 范围内,能够满足动物疫苗佐剂的质量控制标准,并且操作简单,检测效率高,能够满足实验室日常检测需求。
参考文献
[1] T/CVDA02 复合矿物油动物疫苗佐剂[ S ].
[2] GB/T13892 表面活性剂 碘值的测定[ S ].
