PBL细胞
来源：上海西格生物科技有限公司
发布时间：2021-08-20 11:24:23
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英文简称:PBL细胞
产品名称:外周血淋巴细胞
规格:外周血淋巴细胞
形态特性:1640
生长特性:悬浮
特征特性:
培养条件:
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
P27 ELISA Kit； 人P27蛋白ELISA试剂盒
IgM ELISA Kit； 人P0蛋白抗体ELISA试剂盒
IgG ELISA Kit； 人P0蛋白抗体ELISA试剂盒
OJ/IleRS ELISA Kit； 人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体ELISA试剂盒
AcSDKP ELISA Kit； 人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸ELISA试剂盒
NAG ELISA Kit； 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶ELISA试剂盒
NMDAR ELISA Kit； 人N-甲基-D-天冬氨酸受体ELISA试剂盒
N-Cad ELISA Kit； 人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白ELISA试剂盒
N-MID-OT ELISA Kit； 人N端中段骨钙素ELISA试剂盒
NT-proBNP ELISA Kit； 人N端前脑钠素ELISA试剂盒
NLR ELISA Kit； 人NOD样受体ELISA试剂盒
NET-1 ELISA Kit； 人NET-1 ELISA Kit
NOX3/MOX2 ELISA Kit； 人NADPH氧化酶3ELISA试剂盒
NOX1/MOX1/NOH1 ELISA Kit； 人NADPH氧化酶1ELISA试剂盒
NHE3 ELISA Kit； 人Na+/H+交换体3ELISA试剂盒
CEL ELISA Kit； 人NELISA试剂盒
NMDA Antibody IgG ELISA Kit； 人N -甲基- D -天冬氨酸抗体IgGELISA试剂盒
MINA ELISA Kit； 人MYC诱导核抗原ELISA试剂盒
MXD1 ELISA Kit； 人MAX二聚化蛋白1ELISA试剂盒
DUSP-1 ELISA Kit； 人MAP磷酸酶双特异性磷酸酶1ELISA试剂盒
L-Selectin/CD62L ELISA Kit； 人L选择素ELISA试剂盒
L-LDH ELISA Kit； 人L-乳酸脱氢酶ELISA试剂盒
LAO ELISA Kit； 人L-氨基酸氧化酶ELISA试剂盒
Klotho ELISA Kit； 人Klotho ELISA Kit
Ki-67 ELISA Kit； 人KI-67抗原ELISA试剂盒
Jo1/HRS ELISA Kit； 人Jo1抗体/抗组氨酰tRNA合成酶抗体ELISA试剂盒
COL4A3 ELISA Kit； 人IV形胶原蛋白α3链ELISA试剂盒
IGHG3 ELISA Kit； 人Igγ3链C区ELISA试剂盒
ICOSLG ELISA Kit； 人ICOS配体ELISA试剂盒
IRAP ELISA Kit； 人ICE蛋白酶激活因子ELISA试剂盒
COL I ELISA Kit； 人I 型胶原蛋白ELISA试剂盒
H-Cad/CDH13 ELISA Kit； 人H-钙粘着蛋白/H-钙粘连蛋白ELISA试剂盒
PBL细胞HSP60 IgM ELISA Kit； 人HSP60 IgM抗体 ELISA Kit
HSP60 IgG ELISA Kit； 人HSP60 IgG抗体 ELISA Kit
HSP60 IgA ELISA Kit； 人HSP60 IgA抗体 ELISA Kit
H-ras ELISA Kit； 人H-ras ELISA Kit
HLA-DPA1ELSIA ELISA Kit； 人HLAⅡ类组织相容性抗原，DPα1链ELISA试剂盒
HTATIP2/TIP30 ELISA Kit； 人HIV-1 TAT互动蛋白2ELISA试剂盒
1+2 ELISA Kit； 人HIVELISA试剂盒
IgG ELISA Kit； 人H5型禽流感病毒ELISA试剂盒
GPR152/PGR5 ELISA Kit； 人G蛋白偶联受体152ELISA试剂盒
GPR109A ELISA Kit； 人G蛋白偶联受体109AELISA试剂盒
GPBAR1 ELISA Kit； 人G蛋白偶联胆汁酸受体1ELISA试剂盒
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