小鼠游离脂肪酸ELISA试剂盒操作步骤

来源:上海恒远生物科技有限公司
发布时间:2011-02-18 16:13:52

                                                  小鼠游离脂肪酸ELISA试剂盒操作步骤

操作步骤

  1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

 

800μmol/L

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

400μmol/L

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

200μmol/L

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

100μmol/L

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

50μmol/L

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

 

 

  1. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  2. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
  3. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
  4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  5. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  6. 温育:操作同3。
  7. 洗涤:操作同5。
  8. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  9. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  10. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

公司主营产品:ELISA试剂盒,Omega试剂盒,放免试剂盒,ATCC细胞,血清,抗体,生物科研试剂、实验耗材等

 

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