Capan-2细胞

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英文简称:Capan-2细胞
产品名称:胰腺癌细胞
规格:T25
形态特性:多边形
生长特性:贴壁生长
特征特性:
培养条件:McCoy's 5a +10%FBS

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
HBQ1 血红蛋白theta亚型1抗体
HBS1L hbs1样蛋白抗体
HCAP G 缩素复合物亚型蛋白3抗体
HCC1 RNA结合蛋白39抗体
HCCS 全细胞色素C合成酶抗体
HCP1 血红素转运蛋白1抗体
HCP5 血红素转运蛋白5抗体
HCST 造血细胞信号转导蛋白抗体
HDHD1A 卤酸脱卤酶样水解酶域内含蛋白1A抗体
HECTD1 E3连接酶抑制素受体抗体
HDPTP His 结构域内含酪氨酸磷酸酶蛋白抗体
HEAB 多聚腺苷酸因子Clp1蛋白抗体
heavy chain cardiac Myosin 心肌肌球蛋白重链抗体
HECT E3 ubiquitin ligase HECT E3泛素链接酶抗体
HDAC11 组蛋白去乙酰化酶11抗体
Phospho-HSL (Ser959 + Ser960) 磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体
Hho1 HHO1蛋白抗体
Phospho-HP1 gamma (Ser93) 磷酸化染色质相关蛋白1-γ抗体
Phospho-HSL (Ser863) 磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体
phospho-Histone H1.4(Thr18) 磷酸化组蛋白H1.4抗体
HAGH 羟酰谷胱甘肽水解酶蛋白抗体
phospho-HDAC5 (Ser498) 磷酸化组蛋白去乙酰化酶5抗体
HCMV/Cytomegalovirus Glycoprotein B 人巨细胞病毒抗体
Phospho-HDAC4 (Ser632) + HDAC5 (Ser498) + HDAC7 (Ser486) 磷酸化组蛋白去乙酰化酶4/5/7抗体
Phospho-HER2 (Tyr877) 磷酸化HER2受体抗体
Phospho-HSL (Ser660) 磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体
HURP 肝癌上调蛋白抗体
Hrasls3 HRAS样抑制因子3抗体
CBS 丝氨酸羧甲半胱氨酸合成酶抗体
HEC1 癌细胞高表达蛋白Hec1抗体
Capan-2细胞Phospho-HSL (Ser865) 磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体
HDAC1 组蛋白去乙酰化酶1抗体
C1GALT1C1 半乳糖基转移酶2抗体