HPASMC细胞

来源:上海西格生物科技有限公司
发布时间:2021-08-24 09:59:15

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英文简称:HPASMC细胞
产品名称:肺动脉平滑肌细胞
规格:肺动脉平滑肌细胞
形态特性:DMEM
生长特性:贴壁
特征特性:
培养条件:

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养*。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

结肠癌细胞
细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Cyclin D2 周期素D2抗原 0.5mg
Cyclin D3(C-term) 周期素D3抗原 0.5mg
CYP3A4(Cytochrome p450 3A4) 细胞色素P450 3A4抗原 0.5mg
Cyr61/IGFBP10/CCN1(cysteine rich 61) 富半胱氨酸肝素结合蛋白61抗原 0.5mg
HCMV UL23/HHV5 UL23(Human Cytomegalovirus UL23 Gene) 人巨细胞病毒UL23抗原 0.5mg
DAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受体-D1抗原 1mg
DRD3 receptor(dopamine D3 receptor) 多巴胺受体-D3抗原 0.5mg
DRD4 receptor peptide 多巴胺受体-D4抗原 0.5mg
DRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多巴胺受体-D5抗原 0.5mg
DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多巴胺β羟化酶(抗原) 0.5mg
DCC (Deleted in colorectal cancer gene) 结直肠癌缺失基因抗原 0.5mg
DCX(Doublecortin) 双皮质素抗原 0.5mg
DDB2(DNA damage-binding protein 2) 损伤DNA结合蛋白2抗原 0.5mg
Defensin Beta1 防御素β1抗原 0.5mg
Defensin Beta1(human) 防御素β1抗原(人) 0.5mg
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原(小鼠) 0.5mg
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat) 防御素β2抗原(大鼠) 0.5mg
DAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相关蛋白激酶1抗原 0.5mg
DHAV(duck hepatitis A virus) 鸭甲型肝炎A病毒抗原 0.5mg
HPASMC细胞Des(Desmin) 结蛋白抗原 0.5mg
DKK1(Dickkopf 1) 抑癌蛋白DKK1抗原 0.5mg
DMBT1 (Deleted in malignant brain tumor 1) DMBT1抑癌基因抗原 0.5mg
DNA-PKcs peptide DNA依赖蛋白激酶催化亚基多肽抗原 0.5mg
DPPA2 (developmental pluripotency associated gene2) 多能发育相关基因2抗原 0.5mg
DR4/APO2/TRAILR1 (Death receptor 4) 死亡受体4抗原 0.5mg
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 肿瘤细胞调亡素/死亡受体5抗原 0.5mg
DP-I/DSP(desmoplakin I ) 桥粒斑蛋白1抗原 0.5mg
DVL1 (dishevelled 1) 蓬乱蛋白1 0.5mg
Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鸟苷三磷酸酶-发动蛋白2抗体 0.5mg
Nadrin peptide 发育调节蛋白多肽抗原 0.5mg
E2F1 转录因子E2F-1 0.5mg
E2F2 转录因子E2F-2抗原 0.5mg
E2F4 转录因子E2F-4抗原 0.5mg
E2F6 转录因子E2F-6抗原 0.5mg
E2 tag E2 tag多肽抗原 0.5mg
EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 胶质细胞谷氨酸运载蛋白3抗原 0.5mg
EBNA-3 (Epstein barr nuclear antigens 3) EB病毒编码核蛋白-3 0.5mg
ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 内皮素转化酶1抗原 0.5mg

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