银黄口服液是一种清热解毒、消炎药物,用于上呼吸道感染、急性扁桃体炎、咽炎等症。由金银花、黄芩提取物经加工而成。主要化学成份是绿原酸和黄芩甙,现已被《药典》1995年版一部收载,含量测定方法是分光光度法。本文利用高效液相色谱法(HPLC),使绿原酸和黄芩甙经分离而直接测定,更好地消除了两组分之间和其它未知成分干扰,因而测定结果更加可靠。
1 仪器、试药与药品
Watcrs 501泵、484检测器、7725进样品、国产色谱工作站。乙腈(色谱纯);枸橼酸(分析纯);三乙胺(分析纯);重蒸馏水。绿原酸、黄芩甙对照品(药品生物制品所)。银黄口服液、金银花、黄芩(市售)。
2 色谱条件
色谱柱:Nova-Pack C18 200mm×4.6mm 4μ;流动相:0.05mol/L枸橼酸(pH=4用三乙胺调)-乙腈(39∶21);流速:1.0ml/min;检测波长:324nm。
3 标准溶液的配制
3.1 标准贮备液制备:分别精密称取减压干燥后的绿原酸和黄芩甙适量,置同一量瓶中,加流动相溶解成浓度绿原酸约为1mg/ml和黄芩甙约为2mg/ml的溶液。
标准溶液制备:精密量取标准贮备液适量,加流动相稀释成绿原酸约为20μg/ml和黄芩甙约为40μg/ml混合的溶液,过滤备用。
3.2 线性范围:分别精密量取标准贮备液适量,加流动相稀释成绿原酸为10203040和50μg/ml和黄芩甙为20406080和100μg/ml的溶液。精密量取适量注入色谱仪中,按上述色谱条件记录色谱图,测得峰面积,以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标绘制标准曲线,得回归方程和相关系数(见表1)。
