麦冬为百合科沿阶草属植物麦冬ovhiopogon aponicus (Thunb．)Ke卜Gaw1．的干燥块根，是一味常用于滋阴的中药，始载于《神农本草经》，历代重要的本草都有记载。麦冬具有养阴生津、润肺清心的功能，可用于热病伤津、心烦口渴等症。市售商品浙麦冬、川麦冬均属该种。现代研究发现：麦冬含有甾体皂苷、高异黄酮、多糖、氨基酸等成分．药理实验表明其中麦冬皂苷类成分具有一定的抗心肌缺血、抗心律失常等作用，在中医临床上用于治疗冠心病、心绞痛并取得了一定疗效【11。由于缺少麦冬化学成分的对照品，《药典)2005 年版(一部)田中麦冬品种项下没有收录麦冬皂苷的含量测定方法。只收载了以对照药材作为对照的薄层鉴别项，难以对药材整体的质量进行科学的评价。麦冬皂苷D在川麦冬中含量较高[31．本文采用常规色谱法和高效液相色谱法相结合，探索了川麦冬中麦冬皂苷D标准品的分离制备，其分离工艺简单，便于操作。可以获得大量高纯度的麦冬皂苷D对照品，可满足常规分析检测的要求，以期为川麦冬的进一步开发和利用提供参考。
1仪器和材料
1．1实验仪器
Nicolet 710傅里叶变换红外光谱仪(KBr压片)；600 MHz核磁共振波谱仪(Varian公司，TMS作内标)；Agilent 6520四极杆一飞行时间串联质谱系统；HITACHIPUMP L一2100输液泵(日立)，Alhech ELSD2000ES检测器(分析之星色谱工作站)，色谱柱：COSMOSIL C18(250．0 mmx4．6 ulln，5 m)；XI4 型显微熔点仪(上海精密，温度计未校正)；电子天平Mettler Toledo；旋转蒸发仪RE52—98(上海亚荣)。
1．2实验试剂
HPLC用乙腈为色谱纯．水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯；柱色谱用硅胶及薄层色谱硅胶(青岛海洋化工厂)； Sephadex LH一20(美国Ame~ham)；反相硅胶(Merck)。
1．3药材
麦冬药材产地为四川。购自雅安三九中药材科技产业化有限公司。并经海洋大学生药学博士刘红兵副教授鉴定为百合科沿阶草属植物麦冬ophiopogonjaponicus(Thunb．J Ker—Gaw1．。
2方法与结果
2．1川麦冬对照品的制备工艺取干燥麦冬4 kg块根粉碎，以1O倍量体积分数为80％的乙醇回流提取3次，每次2 h，合并提取液，回收乙醇后得稠膏2 L，加水稀释至10 L，依次用3倍量乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取。取正丁醇部分样品180 g，经硅胶减压柱层析 (溶剂系统为氯仿：甲醇：水，90：10：1—50：50：5)分成多个部分，经薄层色谱检查合并，得到含麦冬皂苷D为主的部位(氯仿：甲醇：水，70：30：3)25 g，此部位经加压硅胶柱层析(溶剂系统为氯仿：甲醇：水，80：20：5)，得到较纯品4．5 g；再经反相硅胶柱(ODS)进行分离，以甲醇：水(20：80～50：50)梯度洗脱，每次收集洗脱液100 ml，根据TLC检测结果，合并相同流分，收集60％～70％甲醇洗脱部分，然后经Sephadex LH一20以95％乙醇洗脱，经液相检测收集含量大于99％的洗脱液，结晶得无色针晶(800 mg)。
2．2对照品的结构确证无色针晶(甲醇)，分子式c44H 00 6，ESI—MS(neg．)m／z 853 『M—H1一，熔点262-263℃，IR l~maxem一1：3 600—3 200(一OH)， 1 640 fC=C)，1 060(C—O—C)，980，920，900，860(intensity 920 <900)， H—NMR(600 MHz，C5D5N)6：4．81( H，d，J=7．2 Hz， H一1 ，)、5．51( H，d，J=4．8 Hz，H—l，)、5．98( H，br．s，H一1 ，)； ”C—NMR(600 MHz，CsDsN)8：84．3(C一1)、38．0(c一2)、68．2(c一3)、 43．8(C一4)、139．6(C一5)、124．7(C一6)、31．7(C一7)、33．0(C一8)、 50．0(C一9)、50．0(C一10)、24．0(C一11)、40．4(C一12)、40．1(C一13)、 57．1(C一1 4)、32．0(C一15)、81．1(C一1 6)、63．0(C一17)、16．8(C一18)、 14．9(C一19)、41．9(C一2o)、15．0(C一21)、109．2(C-22)、32．4(C一23)、 29．2 (C一24)、30．5 (C一25)、67．0 (C一26)、17．3 (C一27)、fucose 100．4(C一1，)、74．7(C一2，)、85．5(C一3，)、72．6(C一4，)、71．0(C一5，)、 17．1(C一6，)、rhamnose 101．8(C一1 ，)、72．6(C一2 ，)、72．7(C-3 ，)、 74．2(C一4 ，)、69．3(C一5 、19．1(C一6--)、xylose 106．7(C—l ，)、 73．4(C一2 ，)、78．4(C一3 ，)、70．8(C一4 ，)、66．7(C一5 ，)，以上波谱数据与文献 报道一致。因此确证该化合物为麦冬皂苷D fophiopogonin D)，见图1。
