产品属性：
产品名称：(a/b)锦鲤疱疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

货号：BH-P063656

规格：50次

分类：荧光定量PCR试剂盒

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光，快递免费送货上门。

储存条件：

公司产品仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，总线后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。总线好设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用总线高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。

C-型凝集素域家族2成员C(CLEC2C)酶联免疫试剂盒霉酚酸 98%2-甲基丁基乙酸酯 99%5ˊ-二磷酸腺苷钡盐

C-型凝集素域家族11成员A(CLEC11A)酶联免疫试剂盒2-氯-3-硝基吡啶 >99.0% (HPLC)2-甲基丁基乙酸酯 99%, Kosher二磷酸腺苷单盐

C-型钠尿肽(CNP)酶联免疫试剂盒三(五氟苯基)烷 97%甲基庚烯酮 98%肌苷-5'-二磷酸二钠盐

C-肽(C-Peptide)酶联免疫试剂盒琼脂粉 灰分ash ≤1.5%，High gel strength(1000-1200 g/cm2)2-甲基丁酸2-甲基丁酯  97%腺苷-5’-二磷酸一钠

CytospinB蛋白(CYTSB)酶联免疫试剂盒石油 AR,bp 90-120 °C2-甲基丁酸2-甲基丁酯  ≥97%, Kosher, FG D-纤维二糖

CytospinA蛋白(CYTSA)酶联免疫试剂盒烯酯 98%二甲基丁酸叶酯 98%胞苷-5'-二磷酸二钠盐(CDP.Na2)

Cystin1蛋白(CYS1)酶联免疫试剂盒氯甲酸苄酯 96%异丁酸麦芽酚酯 98%胞苷-5'-单磷酸二钠盐(CMP.Na2)

Cylindromatosis蛋白(CYLD)酶联免疫试剂盒2-氯异酸乙酯 97%异丁酸麦芽酚酯 ≥98%, FGTFA-aa-U

Cylicin2蛋白(CYLC2)酶联免疫试剂盒环戊 99%乙酸对甲基苄酯 98%TFA-aa-dU

Cylicin1蛋白(CYLC1)酶联免疫试剂盒N,N-二苯基氯甲酰  98%2-甲基戊酸 ≥98%, FCC, FG5-尿苷

Cupidin蛋白(CPD)酶联免疫试剂盒氯甲酸异丁酯 98%4-甲基戊酸 98%5--2'-脱氧尿苷(苷)

Cullin9蛋白(CUL9)酶联免疫试剂盒氯甲酸异酯  97%4-甲基戊酸 ≥98%, FCC, FG5--2'-脱氧胞苷

Cullin7蛋白(CUL7)酶联免疫试剂盒4-甲基环己酮 98%4-乙烯基愈疮木酚  ≥98%，Kosher2'-甲氧基尿苷

Cullin5蛋白(CUL5)酶联免疫试剂盒氯甲酸-4-硝基苄酯 97%乙酸辛酯 98%2'-甲氧基胞苷

Cullin4B蛋白(CUL4B)酶联免疫试剂盒吡唑 99%乙酸辛酯 ≥98%, FCC, FGN2-异丁酰基鸟苷一水合物

Cullin4A蛋白(CUL4A)酶联免疫试剂盒1,5-戊二 97%E-2-辛烯 95%N4-苯甲酰胞苷
(a/b)锦鲤疱疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书5-O-Ethylcleroindicin D

488138-32-5

中文名：

别 名：

分子式：C10H16O4

性状：Oil

纯度：%

5-Hydroxymethyl-2-furoic acid

6338-41-6

中文名： 5-羟甲基-2-糠酸

别 名： 5-Hydroxymethyl-2-furancarboxylic acid

分子式：C6H6O4

性状：Powder

纯度：%
使用方法:
一、稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。
1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液，*用带芯枪头，下同）。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照（浓度为 1×10E8 拷贝/μL，试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品，则需要进行 N+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复，则标记 N+9 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），6 个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做 1 次重复，则标记 N+4 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），1 个用于PCR 阳性对照。