一、实验材料
1.1 免疫亲和柱：黄曲霉毒素量免疫亲和柱
1.2 色谱柱： C18 (4.6*150mm 5μm)
二、实验方法：我们公司可以提供全套的相关装置产品。（荧光检测器，柱后衍生系统等）
如果您在实验中，需要我们技术帮助和支持，欢迎您来电咨询。
1.1混合对照品溶液的制备 精密量取黄曲霉毒素混合标准品（黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2标示浓度分别为1. 0µg/mL、0.3µg/mL、1.0µg/mL、0.3µg/mL）1mL，置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为储备液。精密量取储备液1mL，置50mL量瓶中，用70％甲醇溶液稀释至刻度，即得。
1.2 供试品溶液的制备 取供试品粉末约10g，精密称定，加入氯化钠2g，精密加入70%甲醇溶液100mL，超声处理20分钟，离心5分钟（离心速度8000转/分），精密量取上清液10mL，置50mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取25mL，通过免疫亲和柱，流速每分钟2-3mL，用水5mL淋洗，洗液弃去使空气进入柱子再用甲醇1.4mL分2次洗脱，收集洗脱液，用水定容至2mL，即得。
1.3测定法 分别精密吸取上述混合对照品溶液20µl、供试品溶液20µl，注入液相色谱仪，测定峰面积，从标准曲线上读出供试品中相当于黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的量，计算，即得。
三、色谱条件
仪器：高效液相色谱仪（北京京科瑞达科技有限公司LC-2100），荧光检测器，光化学柱后衍生装置 色谱柱： C18 (4.6*150mm) 进样量：20µl; 柱温：40℃; 流速：1.1mL/min
梯度洗脱程序：见表1（B：乙睛；C：甲醇；D：水）
表1 梯度洗脱程序
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| Time | Flow | %A | %B | %C | %D |
| 1 | 0.01 | 1.10 | 0.0 | 10.0 | 25.0 | 65.0 |
| 2 | 17.00 | 1.10 | 0.0 | 10.0 | 45.0 | 45.0 |
| 3 | 17.50 | 1.10 | 0.0 | 10.0 | 25.0 | 65.0 |
四、实验结果
4.1 柱回收实验：
取酸枣仁提取液5mL，加2ppb混标5mL，用水稀释至50mL，同法以IAC柱净化，测定，计算回收率，见表2
表2 柱回收率实验（2ppb）
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| G2 | G1 | B2 | B1 | |
| 峰面积 | 标液 | 43312 | 70186 | 71599 | 102448 |
| 1 | 50909 | 81338 | 84045 | 123450 | |
| 2 | 50909 | 81338 | 84045 | 123450 | |
| 3 | 52124 | 84091 | 86785 | 125209 | |
| 4 | 52832 | 83899 | 86318 | 121965 | |
| 5 | 49030 | 77503 | 81502 | 115793 | |
| 回收率 | 1 | 94.03 | 92.71 | 93.91 | 96.40 |
| 2 | 94.03 | 92.71 | 93.91 | 96.40 | |
| 3 | 96.28 | 95.85 | 96.97 | 97.77 | |
| 4 | 97.58 | 95.63 | 96.45 | 95.24 | |
| 5 | 90.56 | 88.34 | 91.06 | 90.42 | |
| 平均 | 94.50 | 93.05 | 94.46 | 95.25 | |
| RSD | 2.83 | 3.26 | 2.50 | 2.99 | |
4.2进样精密度实验，见表3
表3 精密度实验（n=6）
| n | G2 | G1 | B2 | B1 |
| 1 | 40388 | 64089 | 73374 | 104343 |
| 2 | 40275 | 64031 | 73154 | 104405 |
| 3 | 41324 | 64982 | 73406 | 104862 |
| 4 | 40265 | 64785 | 73938 | 104432 |
| 5 | 40993 | 65243 | 74473 | 105622 |
| 6 | 40726 | 64987 | 74403 | 106207 |
| 平均 | 40661.83 | 64686.17 | 73791.33 | 104978.5 |
| RSD | 1.06% | 0.78% | 0.76% | 0.73% |
