操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及*湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
公司细胞现货供应,质量有保证、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供*价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
产品名称 |
英文名称 |
规格 |
货号 |
(+)-JQ1羧酸 |
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1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg |
BJ-01X10894 |
中文名称:(+)-JQ1羧酸
英文名称:JQ-1 carboxylic acid
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
发货周期:1~3天
(+)-JQ1羧酸是(+)-JQ1的羧酸形式,用于衍生物合成。
注意事项:
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:202592-23-2
别名:(+)-JQ-1 carboxylic acid;6H-Thieno[3,2-f][1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]diazepine-6-acetic acid, 4-(4-chlorophenyl)-2,3,9-trimethyl-, (6S)-
纯度:99.59%
分子式:C₁₉H₁₇ClN₄O₂S
分子量:400.88
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
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细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
9,10-菲醌(>99.0%(GC)) 质量规格:>99.0%(GC) 9,10-Phenanthrenequinone 婴儿双歧杆菌 Bifidobacterium infantis
盐巴马汀;黄藤素;棕榈碱 英文名称:Bamatin hydrochloride; palmatine; palmatine 保存:-20℃ 规格:HPLC≥98% 20mg/支 转化生长因子β2抗体
芦竹碱; 克胺; 3-二氨基基吲哚; 订购|咨询 规格: HPLC≥98%,20mg/支 人高密度脂蛋白结合蛋白(HDLBP)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠孤啡肽(OFQ)ELISA试剂盒,英文名:OFQ ELISA Kit
枸橘甙 英文名称:Poncirin 保存:-20℃ 规格:HPLC≥98% 20mg/支 化SH2结构域转化蛋白1抗体
褪黑素 订购|咨询 规格: 20mg 人细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒,英文名:CTX-Ⅰ ELISA Kit
苦蒿素 订购|咨询 规格: 20mg 人水通道蛋白9(AQP9)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒,英文名:ANG-1 ELISA Kit
盐青藤碱 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 ELISA Kit for Human Alpha-type platelet-derived growth factor receptor大鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒,英文名:Col Ⅱ ELISA Kit
依达拉奉 英文名称:Nateglinide 保存:-20℃ 规格:50mg 化丝氨/苏氨激酶p90RSK蛋白抗体
人参皂苷F1 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 人细胞角蛋白19(KRT-19)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠转铁蛋白受体(TFR)ELISA试剂盒,英文名:TFR ELISA Kit
胞苷 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;20mg ELISA Kit for Human Heat shock cognate 71 kDa protein小鼠多聚蛋白2(MMRN2)ELISA试剂盒,英文名:MMRN2 ELISA Kit
茄尼 规格: HPLC≥97%;20mg 订购|咨询 ELISA Kit for Dehydroepiandrosterone小鼠组织因子(TF)ELISA试剂盒,英文名:TF ELISA Kit
肌 英文名称:Creatine 保存:-20℃ 规格:100mg 多通道膜蛋白PTCHD2抗体
辽东楤木皂苷V 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 人丙酰辅酵素A羧化酶Beta(PCCb)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠B因子(BF)ELISA试剂盒,英文名:BF ELISA Kit
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