培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
产品属性:
中文名称:(2-Hydroxypropyl)-β-cyclodextrin
英文名称:(2-Hydroxypropyl)-β-cyclodextrin
产品规格:1mL(10mM)|1g|5g|10g
发货周期:1~3天
(2-Hydroxypropyl)-β-cyclodextrin是广泛使用的药物递送载体,可提高稳定性和利用度。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! CAS号:128446-35-5 别名:Hydroxypropyl betadex;Hydroxypropyl-β-cyclodextrin;HP-β-CD 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
我们科研实验室:
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,*将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞*;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,*在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
SMC1 染色体结构维持蛋白1抗体 规格: 0.2mlMSH3 错配修复蛋白3抗体 规格: 0.1mlMouse Anti-rat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1mlBag1/RAP46 抑凋亡基因bag1抗体 规格: 0.1mlTSPAN20/UPIb 四分子交联体20抗体(四旋蛋白) 规格: 0.2ml
(2-Hydroxypropyl)-β-cyclodextrin脑膜脓毒性金黄杆菌
龋罗斯氏菌
孔兹创伤球菌
Pantoeastewartiisubsp.stewartii
葡萄细菌性疫病菌
燕麦食酸菌燕麦亚种
Clavibactermichiganensissubsp.michiganensis
野油菜黄单胞菌
Bacillussubterraneus
Bacillussolimangrovi