液相色谱法测定氯霉素CAP残留

(1)试剂和材料 除另有规定外所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水或相当的去离子水。:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" />

①乙酸乙酯：分析纯

②甲醇：紫外光谱级

⑧正己烷：分析纯

④高氯酸：分析纯，o．5mol几

⑤氯霉素标准品：含量≥99％

⑥氯霉素标准溶液：准确称取适量的氯霉素标准晶，用甲醇配成o．10mg／m1的标准贮备液，根据需要吸取适量贮备液，将甲醇吹去后用o．5mol／L高氯酸溶液配制成症当浓度的标准工作液。

(2)仪器和设备

①液相色谱仪：配有紫外线检测器

②均质器：10000r／mln

③离心机：3000r／Hill)．

④微量注射器：25~L、i00~L

(3)测定步骤

①提取与净化 称取5。0s均匀试样(至o．:namespace prefix = st1 ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:smarttags" />1g)于50ral离心管中，加入lOml乙酸乙酯，称量后在均质器中快速均质lmin，离心3min。再称量，补人损失的乙酸乙酯。移取5．Oral乙酸乙酯提取液，置于带塞尖底离心管中，在45~C水浴中用氮气吹去乙酸乙酯。残留物用o．5ml高氯酸溶液溶解，称量后，加入lml正己烷，振荡lmin，静置分层后用吸管吸弃正己烷层。再重复处理3次。用氮气吹去残余的正己烷，称量，加入高氯酸溶液，以补入损失量。经o．45／zm滤膜过滤后，供测定用。

②测定

a.色谱条件

色谱柱：uBondapakCy

波长：280nm

流动相：甲醇—水混合液(35+65)

流速：lml／mia

色谱柱温度：40~C

b．色谱测定 根据样液中氯霉素含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中氯霉素响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插进样测定，在上述色谱条件下，氯霉素保留时间约为7．2rain。

(4)空白试验 除不加试样外，按上述测定步骤进行。

(5)计算 用色谱数据处理机或按下列公式计算试样中氯霉素残留量：

X=Acs/Asc

X--试样中氯霉素残留量，mg／kg；

A--样液中氯霉素的峰面积；

As--标准工作溶液中氯霉素的峰面积；

Cs--标准工作溶液中氯霉素的浓度，Ps／ml

c--终样液所代表的试样浓度，8／ml。

注：计算结果需扣除空白值。

（6)检测限和回收率

本方法的检测限为o．01mg／kg。

在0．010～1 00mg／kg添加浓度水平上，回收率范围为87.2％一98.3％。