牛视网膜毛细血管周细胞的选择性培养结果

发布时间:2011-03-14

1原代周细胞的生长状况用胶原酶消化视网膜血管后分离周细胞,在倒置相差显微镜下观察见大多为单个圆形细胞,大小均一,中心有一圆形不透光区域为细胞核。2wk后大部分细胞贴壁变扁平,成多角形态,伸出较多突起,并逐渐形成集落生长。3wk后,细胞铺满,致密排列,重叠多层。传代后周细胞在4h内开始贴壁,细胞由圆形伸展为多角形,大多呈多角形,伸出较多突起。3~4d后细胞融合成密集的单层细胞,排列成不规则栅栏状。1wk后,细胞铺满,致密排列,重叠多层。

2.2周细胞的鉴定和增殖ATIN免疫组织化学染色显示周细胞胞质内不着色。Ⅷ因子抗体免疫组织化学染色显示周细胞胞质内特异性蓝紫色着色。阳性率为。采用该方法获得的PC均能传代培养。而且,传代培养后细胞增殖速度均较原代培养时明显增快,4~5d即进入对数生长期,直到9~10d才进入平台期。

图1A周细胞原代,图中黑色团块为死亡的杂细胞200×;B接种4小时的周细胞第二代,周细胞开始贴壁、变形400×;C融合的周细胞第二代200×;D周细胞鉴定

 

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